Thermo Fisher Scientific Exonuclease I, standard concentration, (10 units/μL), 5000 U

Applied Biosystems™ Exonuclease I (Standard Concentration, 10 units/μL)

제품 설명

Exonuclease I은 단일 가닥 DNA를 3’→5’ 방향으로 가수분해하여 5’-모노뉴클레오티드를 방출하고 말단 5’-디뉴클레오티드는 온전한 상태로 유지합니다.
가수분해는 연작용으로 진행되며, 3’ 말단이 인산화된 경우 반응이 진행되지 않습니다.
이 효소는 공유 결합적으로 닫힌 원형 단일 가닥 DNA의 엔도뉴클레오리틱 분할 측정이나 DNA 헬리카제 활성 측정에도 사용될 수 있습니다.

또한 Exonuclease I은 염기서열 분석 또는 라벨링을 포함하는 애플리케이션을 위한 PCR 산물 준비에 매우 유용합니다. PCR 산물 내 여분의 프라이머 및 단일 가닥 DNA를 효율적으로 제거하여 후속 효소 반응의 간섭을 방지합니다.
Shrimp Alkaline Phosphatase(PN 78390)와 함께 사용하면 추가적인 정제 과정(컬럼, 젤, 자기 분리 등)이 필요하지 않습니다.

PCR 세척 관련 자세한 내용은 USB ExoSAP-IT 프로토콜을 참조하십시오.
ExoSAP-IT를 구입하면 Exonuclease I과 SAP를 사용한 PCR 세척 방법에 대한 라이선스가 포함됩니다.

특성

순도

SDS-PAGE 기준 95% 이상 순도.
엔도뉴클레아제, 이중 가닥 엑소뉴클레아제 및 RNase 오염 테스트 완료.

저장 완충액

20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 5 mM 2-메르캅토에탄올, 0.5 mM EDTA, 50% 글리세롤.

분석 조건

반응 혼합물(100 μL):

• 67 mM 글리신 완충액 (pH 9.5)
• 10 mM 2-메르캅토에탄올
• 6.7 mM MgCl₂
• 0.5 mM 변성 DNA 및 효소 포함
  배양 조건: 37°C에서 30분

단위 정의

1단위(Unit)은 표준 조건(37°C, 30분)에서 변성 DNA로부터 산에 용해되는 뉴클레오티드 10 nmol 방출을 촉진하는 효소의 양.

농도 및 제품 번호

기능적 분석

Sequenase™ Version 2.0 DNA Polymerase Sequencing Kit(PN 70170)를 사용하여 염기서열 분석 전 비결합 프라이머 제거를 위해 PCR 산물을 Exonuclease I으로 처리.

참고 문헌

• GOLDMARK, P. J. & LINN, S. (1972) J. Biol. Chem. 247, 1849–1860.
• ROSAMOND, J., TELANDER, K. M. & LINN, S. (1979) J. Biol. Chem. 254, 8646–8652.
• WERLE, E. et al. (1994) Nucleic Acids Res. 22, 4354–4355.
• HANKE, M. & WINK, M. (1994) BioTechniques 17, 858–860.

사양