Takara EF1-alpha promoter versions of the Tet-On 3G inducible expression system

EF1-alpha Promoter Versions of the Tet-On 3G Inducible Expression System

EF1-alpha 프로모터 버전의 Tet-On 3G 유도 발현 시스템은 CMV 프로모터가 시간이 지나면서 침묵화되는 경향이 있는 세포 유형(예: 조혈세포, 줄기세포)에서도 Tet-On 3G 전사활성화인자(Tet-On 3G transactivator)의 안정적이고 장기적인 발현을 제공합니다.
이를 통해 이러한 세포 유형에서도 장기적인 테트라사이클린 유도 발현(long-term tetracycline-inducible expression)이 가능합니다.

이 시스템은 표준 Tet-On 3G 시스템과 동일한 pTRE3G 벡터를 포함하며, 낮은 배경 발현을 유지합니다. 단, Tet-On 3G transactivator는 CMV 프로모터 대신 EF1-alpha 프로모터에서 발현됩니다.
EF1-alpha 프로모터는 인간 EEF1A1 유전자에서 유래하였으며, 이는 진핵 신장 인자 1의 알파 소단위(eukaryotic elongation factor 1 alpha subunit)를 발현합니다.

성능 평가 (Jurkat 세포 실험 결과)

• 세포주: Jurkat (CMV 기반 벡터에서 발현 감소 및 클론 간 변이 보고된 세포주)
• 결과:
  • 83%의 Jurkat Tet-On 3G 클론에서 강한 유도 발현(strong inducible expression) 확인
  • 33%의 클론에서 매우 높은 유도성(>2,000배) 확인
• 비교: 이전 Tet-On 시스템에서는 이러한 수준의 발현 제어 불가능

이러한 결과는 EF1-alpha 프로모터 버전이 CMV 프로모터 기반 시스템보다 더 안정적이고 강력한 유도 발현 제어를 제공함을 보여줍니다.