
Merck Mammalian V5 Tag Vector Set
포유류 세포에서 V5 태그 단백질 발현을 위한 벡터 세트로, N-말단 및 C-말단 태깅 비교 가능. TEV 절단 부위 포함/비포함 구성 제공. CMV 프로모터 기반 상시 발현. 다양한 클로닝 방식과 호환되며, 다중 클로닝 부위(MCS)에 표준 제한효소 부위 포함.
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Merck Mammalian V5 Tag Vector Set
제품 개요
Mammalian V5 Tag Vector Set은 포유류 세포에서 유전자의 발현 및 검출을 최적화하기 위한 벡터 세트입니다.
이 세트는 V5 epitope 태그를 유전자의 N-말단 또는 C-말단에 부착하여 발현 효율을 비교할 수 있도록 설계되었습니다.
또한 TEV (Tobacco Etch Virus) 프로테아제 절단 부위가 포함된 구성과 포함되지 않은 구성을 모두 제공합니다.
TEV 절단 부위는 단백질 생산 후 V5 태그 제거를 가능하게 합니다.
주요 특징
- N-말단 및 C-말단 V5 태그 비교 가능
- TEV 절단 부위 포함/비포함 선택 가능
- CMV 프로모터에 의한 상시 발현
- 다양한 클로닝 기술(LIC, Gibson Assembly, InFusionHD, Seamless GeneArt 등)과 호환
- 표준 제한효소 부위를 포함한 다중 클로닝 부위(MCS)
스펙 정보
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| 형태(Form) | Buffered aqueous solution |
| 박테리아 선택 마커 | Kanamycin |
| 포유류 세포 선택 마커 | Puromycin |
| 복제 개시점 | pUC (500 copies) |
| 펩타이드 절단 | TEV / No cleavage |
| 펩타이드 태그 위치 | C-terminal / N-terminal |
| 프로모터 이름 | CMV |
| 프로모터 활성 | Constitutive |
| 프로모터 유형 | Mammalian |
| 배송 상태 | Ambient |
| 저장 온도 | −20°C |
클로닝 및 벡터 설계
이 플라스미드 세트는 다양한 클로닝 기술과 호환되며, 표준 제한효소 부위를 포함한 다중 클로닝 부위(MCS)를 제공합니다.
DNA ligase를 이용한 일반적인 클로닝뿐 아니라, LIC, Gibson Assembly, InFusionHD, Seamless GeneArt 등의 방법도 사용할 수 있습니다.
모든 플라스미드는 동일한 백본을 기반으로 하여 동일한 클로닝 방법을 적용할 수 있습니다.
Multiple Cloning Site (MCS) 구성
- 주요 제한효소 부위: NcoI, XbaI, BsgI, BseRI
- NcoI 부위: Kozak 및 Shine-Dalgarno 서열 하류에 위치한 start codon 포함
- XbaI 부위: stop codon 포함, BsgI/BseRI 절단 시 TA overhang 생성
- BsgI/BseRI 부위: 비대칭 절단 효소로, 모든 태그 플라스미드와 호환되는 오버행 생성
유전자의 start/stop codon 위치는 항상 동일하게 유지되며, 필요 시 외부 제한효소 부위를 이용해 확장할 수 있습니다.
전사 종결(Transcription Termination)
본 플라스미드는 포유류, 박테리아, 박테리오파지(T7) 발현용으로 각각의 전사 종결자(terminator)를 포함합니다.
발현 시스템 변경 시 프로모터만 교체하면 되며, 다른 종결자의 존재는 발현 효율에 영향을 주지 않습니다.
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