Takara HisTALON Gravity Columns—Fast, easy his-tagged protein purification

Takara HisTALON Gravity Columns—Fast, Easy His-Tagged Protein Purification

제품 개요

TALON Metal Affinity Resin은 내구성이 뛰어난 금속 친화성 크로마토그래피(IMAC) 레진으로, his-tagged 단백질에 대한 뛰어난 친화성과 특이성을 제공합니다. 모든 일반적인 IMAC 시약과 호환되며, 네이티브 또는 변성 조건에서 단백질을 정제할 수 있습니다.

TALON Resin은 코발트 이온을 사용하여 재조합 his-tagged 단백질을 정제합니다. TALON은 코발트로 충전된 테트라덴테이트 킬레이터로, 인접하거나 특정 위치에 있는 히스티딘만 결합할 수 있습니다. 이는 니켈 기반 레진(Ni-NTA)보다 더 엄격한 결합 특이성을 제공합니다.

Takara Bio의 HisTALON Gravity Columns는 TALON 레진이 미리 충진된 프리패킹 컬럼으로, 중력 흐름 기반 프로토콜을 사용하여 박테리아, 포유류, 또는 바큘로바이러스 감염 세포에서 his-tagged 단백질을 효율적으로 정제할 수 있습니다. 이 컬럼은 20 mg 이상의 his-tagged AcGFP1을 흡착할 수 있으며, 빠르고 간편하며 재현성 있는 크로마토그래피 분리를 제공합니다. 동일한 단백질 배치에 대해서는 재사용이 가능하지만, 다른 단백질을 정제할 경우 “Complete Regeneration” 방법을 사용해야 합니다.

정제 조건 선택

TALON Resin은 다양한 정제 조건에서 안정적이며, 네이티브 및 변성 조건 모두에서 높은 특이성과 수율을 유지합니다. 선택은 단백질의 위치, 용해도, his-tag 접근성, 후속 응용, 생물학적 활성 유지 필요성에 따라 달라집니다.

네이티브 조건

• 생물학적 활성을 유지하며 단백질이 용해 가능한 경우 가장 효율적
• 재활성화 단계 생략으로 시간 절약 및 활성 손실 최소화
• 효소 서브유닛, 보조인자, 결합 단백질의 공동 정제 가능

변성 조건

• 불용성 응집체(inclusion body)가 형성된 경우 6 M 구아니디늄 또는 8 M 요소를 사용하여 용해도 향상
• 완전한 용해 및 his-tag 노출로 결합 효율 증가
• 변성 상태에서 정제 후 재활성화 또는 재접힘 과정 필요

환원제 사용

TALON Resin은 β-머캅토에탄올 존재하에서도 사용 가능하지만, DTT나 DTE는 사용하지 않아야 합니다. 이는 단백질의 생물학적 활성에 중요한 -SH 그룹을 유지하기 위함입니다. β-머캅토에탄올 존재 시 TALON은 Ni-NTA보다 높은 수율을 제공합니다.

주요 특징

• 사용이 간편한 프리패킹 중력 컬럼
• 생물학적 활성이 높은 단백질 수율 극대화
• TALON Resin으로 높은 순도 및 수율 확보

응용 분야

정제된 재조합 his-tagged 단백질은 다음 용도로 사용할 수 있습니다:

• 결정학(Crystallography)
• 기능 분석(Functional assays)
• 구조 연구(Structural investigations)
• 기타 생화학적 응용

추가 정보

제품의 저장 조건, 구성 요소 및 기술 사양은 Certificate of Analysis에서 확인할 수 있습니다. Kit Components List는 Documents 탭에서 제공합니다.