Takara Retrovirus integration site analysis kit
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Retro-X Integration Site Analysis Kit은 레트로바이러스 벡터의 통합 위치를 GenomeWalker 기술로 정확히 식별합니다. 고품질 DNA 정제, 제한효소 처리, PCR 증폭을 통해 통합 부위를 분석할 수 있습니다. 세포 클론 3개까지 분석 가능한 완전한 구성품을 포함합니다.
브랜드: Takara
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Retro-X Integration Site Analysis Kit
레트로바이러스 벡터의 재조합 통합 부위를 정확히 식별할 수 있는 키트입니다.
레트로바이러스의 복제 주기 동안 RNA 게놈의 DNA 사본이 숙주 게놈에 통합되며, 통합 위치는 형질전환 유전자 발현과 숙주 세포의 표현형에 중요한 영향을 미칩니다.
이 키트는 GenomeWalker 기술을 이용하여 통합 부위를 식별하고, 이를 시퀀싱 및 분석할 수 있도록 지원합니다.
GenomeWalker 절차
- 형질전환된 클론 또는 세포 집단으로부터 얻은 게놈 DNA를 블런트엔드 절단 효소로 절단합니다.
- 게놈 DNA 라이브러리의 블런트엔드에 GenomeWalker 어댑터를 연결합니다.
- 1차 PCR을 통해 어댑터와 레트로바이러스 서열을 모두 포함하는 DNA 조각을 증폭합니다.
- 2차 ‘nested PCR’을 수행하면 일반적으로 단일 주요 PCR 산물이 생성되며, 이를 시퀀싱하여 통합 위치를 확인할 수 있습니다.
여러 밴드가 나타날 경우 다중 통합 부위를 의미하며, 각각을 정제 후 개별 시퀀싱할 수 있습니다.
구성품 (What is in the kit)
| 구성품 | 설명 |
|---|---|
| NucleoSpin Tissue kit | 형질전환된 포유류 세포에서 고품질 게놈 DNA 정제 |
| 3종 블런트엔드 절단 효소, ligase, GenomeWalker adaptor, PCR primers | 게놈 절단 및 어댑터 연결, PCR 증폭용 구성품 |
| Advantage 2 PCR kit | 게놈 DNA로부터 장거리 PCR 증폭 |
| NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up kit | 증폭된 밴드 정제 및 분리 |
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