Thermo Fisher Scientific T4 DNA Ligase, LC (1 U/μL)

Thermo Fisher Scientific T4 DNA Ligase, LC (1 U/μL)

Thermo Scientific™ T4 DNA Ligase는 이중 DNA 또는 RNA의 인접한 5'-phosphate와 3'-hydroxyl 말단 사이에 포스포디에스터 결합을 촉매합니다.
이 효소는 이중 DNA, RNA 또는 DNA/RNA 하이브리드의 단일 가닥 결손(nick)을 복구하며, 점착말단(cohesive end) 또는 평말단(blunt end)을 가진 DNA 조각을 연결할 수 있습니다. 단일가닥 핵산에는 활성이 없습니다.

T4 DNA Ligase는 ATP를 보조인자로 필요로 합니다.

Highlights

• Thermo Scientific 제한효소, PCR, RT 버퍼(ATP 보충 시)에서도 활성
• 빠른 반응: 점착말단 라이게이션은 실온에서 10분 내 완료
• 평말단 라이게이션 효율 향상을 위한 PEG 용액 포함

Applications

• 제한효소로 절단된 DNA 조각의 클로닝
• PCR 산물 클로닝
• 이중가닥 올리고뉴클레오타이드 링크 또는 어댑터의 결합
• 부위특이적 돌연변이 유도 (Site-directed mutagenesis)
• 증폭 절편 길이 다형성(AFLP)
• 라이게이스 매개 RNA 검출
• 이중 DNA, RNA 또는 DNA/RNA 하이브리드의 결손 복구
• 선형 DNA의 자가 환형화(Self-circularization)

Includes

• T4 DNA Ligase
• 10X T4 DNA Ligase Buffer
• 50% PEG Solution

Notes

• T4 DNA Ligase가 DNA에 결합하면 아가로스 겔에서 밴드 이동이 발생할 수 있습니다. 이를 방지하려면 샘플을 6X DNA Loading Dye & SDS Solution으로 처리 후, 70°C에서 5분 또는 65°C에서 10분간 가열하고 얼음 위에 냉각한 후 전기영동을 수행하십시오.
• 라이게이션 반응 혼합물의 부피는 형질전환 시 competent cell 부피의 10%를 초과하지 않아야 합니다.
• 전기적 형질전환 전에 spin column 또는 클로로포름 추출을 통해 T4 DNA Ligase를 제거하십시오. 추출된 DNA는 에탄올 침전으로 정제할 수 있습니다.

사양