
Takara Guide-it Indel Identification Kit
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CRISPR/Cas9, TALEN, ZFN 등 유전자 편집으로 생성된 인델을 빠르고 정확하게 식별하는 키트. Terra PCR Direct 및 In-Fusion Cloning 시스템을 포함하여 증폭·클로닝·서열 분석까지 완전한 워크플로 제공. 세포 집단의 인델 특성화에 최적화.
브랜드: Takara
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Takara Guide-it Indel Identification Kit
제품 개요
Guide-it Indel Identification Kit은 CRISPR/Cas9, TALENs, zinc finger nucleases 등 뉴클레아제 기반 유전체 편집 기술로 인해 세포 집단 내에서 생성된 다양한 삽입 및 결실(indel)을 식별하기 위한 완전한 워크플로를 제공합니다.
본 키트는 DNA 서열 분석을 위한 변형된 타깃 부위의 증폭, 클로닝 및 준비에 필요한 모든 구성 요소를 포함하고 있으며, 빠르고 신뢰할 수 있는 결과를 제공하도록 최적화된 프로토콜을 제공합니다.
주요 특징
- 유전자 편집 기술로 도입된 다양한 인델을 특성화하는 간소화된 방법
- Terra PCR Direct Polymerase를 이용한 세포로부터 직접 PCR 증폭 및 In-Fusion Cloning 시스템을 통한 15분 내 무라이게이션 클로닝
- Cas9/CRISPR, TALENs, zinc-finger nuclease 기반 편집으로 발생한 인델 식별에 적합
- DNA 서열 분석을 위한 증폭·클로닝·시료 준비에 필요한 모든 구성품 포함
작동 원리
- Terra PCR Direct polymerase를 사용하여 세포 용해액으로부터 직접 타깃 부위를 포함하는 게놈 DNA 단편을 증폭합니다.
- 증폭된 단편은 제한효소 절단 없이 In-Fusion Cloning 시스템을 이용해 선형화된 pUC19 벡터에 직접 클로닝됩니다.
- Stellar Competent Cells로 형질전환 후, colony PCR을 수행하여 플라스미드 내 타깃 영역을 증폭합니다.
- PCR 산물의 DNA 서열 분석을 통해 목표 유전체 부위에서 생성된 인델을 식별합니다.
응용 분야
- 포유류 게놈 DNA 내 삽입 및 결실 검출
- 뉴클레아제 기반 유전자 편집 후 세포 집단 내 다양한 인델 특성화
구성품
| 구성품 | 내용 |
|---|---|
| Terra PCR Direct Polymerase Mix | 110 µl |
| 2X Terra PCR Direct Buffer (with Mg²⁺, dNTP) | 3 × 1 ml |
| Extraction Buffer 1 | 400 µl |
| Extraction Buffer 2 | 40 µl |
| pUC19 Cloning Vector, linearized (50 ng/µl) | 10 µl |
| Colony PCR Forward Primer (15 µM) | 200 µl |
| Colony PCR Reverse Primer (15 µM) | 200 µl |
| PCR-Grade Water | 6 × 1 ml |
| In-Fusion HD Cloning Kit | 1 set |
| NucleoSpin Gel and PCR Clean-up kit | 1 set |
| Stellar Competent Cells | 1 set |
추가 정보
제품의 보관 조건, 구성품 및 기술 사양은 Certificate of Analysis에서 확인할 수 있습니다.
Kit Components List와 Certificate of Analysis는 Documents 탭에서 제공됩니다.
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