Takara Site-directed mutagenesis

Takara Site-directed Mutagenesis (In-Fusion Cloning)

In-Fusion Cloning 제품은 deletion, base substitution, addition 등 다양한 변이 도입(site-directed mutagenesis)을 유연하게 수행할 수 있도록 설계되었습니다. 또한 단일 또는 다중 인서트 클로닝 실험에도 활용 가능합니다.

In-Fusion 기술과 inverse PCR을 결합하여, 특정 염기서열 주변의 DNA를 빠르게 증폭하고 원하는 변이를 효율적으로 삽입할 수 있습니다.

Mutagenesis 수행 방법

• Inverse PCR에서 프라이머는 원형 클로닝 벡터 상에서 서로 반대 방향으로 배열됩니다.
• 변이 유도 시, PCR 프라이머의 5’ 말단에 15-bp 중첩(overlap)을 가지도록 설계하고, 변이 염기를 포함시킵니다.
• PrimeSTAR Max DNA Polymerase(In-Fusion Snap Assembly 번들에 포함된 고충실도 PCR 효소)를 사용하여 PCR을 수행합니다.
• PCR 산물에 In-Fusion Snap Assembly Master Mix를 첨가하고, 제공된 Stellar Competent Cells로 형질전환합니다.
• 최종적으로 ≥95% 확률로 원하는 클론을 얻을 수 있습니다.

주요 특징

• 단일 시스템으로 deletion, substitution, addition 수행 가능
• 모든 벡터와 호환되는 높은 유연성
• 95% 이상 정확도의 높은 성공률 보장

추가 정보

제품의 저장 조건, 구성품, 기술 사양에 대한 자세한 내용은 Certificate of Analysis를 참조하십시오.
키트 구성품 목록은 Kit Components List에서 확인할 수 있습니다.
이 문서들은 제품 페이지의 Documents 탭에서 다운로드 가능합니다.