Takara Cre recombinase RLPs

Takara Cre recombinase RLPs

Cre RNA lentiviral particles (RLPs)는 비통합성 바이러스 유사 입자 내에 Cre mRNA를 탑재하여 포유류 세포에서 빠르고 일시적인 Cre 발현을 유도합니다. 이 입자들은 바이러스 게놈을 포함하지 않으며, 입자당 여러 활성 mRNA를 탑재할 수 있는 새로운 패키징 기술을 사용하여 제작됩니다. RLPs는 세포주, 1차 세포, 줄기세포, 조직 및 생체 내(in vivo) 모델 등 다양한 연구 시스템에서 높은 효율로 단백질을 일시적으로 발현시킵니다.

Cre recombinase RLPs의 장점

기존 Cre 기반 유전자 편집 방법은 각각 한계가 있습니다. 플라스미드 또는 mRNA의 일시적 형질도입은 지속적인 Cre 발현으로 인한 부작용을 줄이지만, 세포 독성 및 생체 내 적용의 어려움이 따릅니다. 반면, 바이러스 벡터를 이용한 Cre 유전자의 전달은 다양한 세포 유형에 적용 가능하지만, 무작위 게놈 통합과 지속적 발현의 위험이 존재합니다.

Cre recombinase RLPs는 이러한 문제를 해결하여 비바이러스성 Cre mRNA를 렌티바이러스 유래 포장체로 전달함으로써 빠르고 효율적인 Cre 발현을 제공합니다. In vitro 실험에서 RLP 매개 루시퍼레이스 발현은 적용 후 4–24시간 사이 최대치에 도달하고, 30시간 내 급격히 감소했습니다. 반면 형질도입 기반 발현은 8시간 이후 검출되었고 24시간에 최고치에 도달했으며, 통합형 렌티바이러스 발현은 24시간 이후에야 검출되었습니다. In vivo 연구에서 RLP를 근육에 주입한 경우, Cre 렌티바이러스 주입과 유사한 범위의 리포터 발현 영역이 관찰되었습니다 (Prel et al., 2015).

Overview

• 비통합성, 바이러스 유사 입자를 통한 활성 Cre mRNA의 효율적 전달
• 무게적 삽입 위험 없이 빠르고 일시적인 Cre 발현
• 세포 활성화나 선택 과정 불필요
• 세포주, 1차 세포, 줄기세포, 조직, 모델 생물 등 다양한 in vitro 및 in vivo 연구에 적합
• 다음 두 가지 포맷 제공:
  • Cre mRNA만 포함 (RLP-CRE-11, 0059VCT)
  • Cre 및 ZsGreen1 mRNA 동시 포함 (RLP-CRE-ZsGreen1-11, 0057VCT)

Applications

• loxP 기반 부위 특이적 재조합을 이용한 유전자 knockout/knockin 연구
• In vitro 및 in vivo 시스템에서의 일시적 Cre 발현 (세포주, 1차 세포, 줄기세포, 마우스 모델 등)

Reference

Prel, A. et al. (2015). Highly efficient in vitro and in vivo delivery of functional RNAs using new versatile MS2-chimeric retrovirus-like particles. Mol Ther Methods Clin Dev. 2:15039.

Additional Product Information

제품의 보관 조건, 구성 성분 및 기술 사양에 대한 자세한 내용은 Certificate of Analysis를 참조하십시오. 구성품 목록은 Kit Components List에서 확인할 수 있습니다. 두 문서는 Documents 탭에서 다운로드 가능합니다.