Takara High-throughput, micro-scale purification of his-tagged proteins—TALON Magnetic Beads

Takara TALON Magnetic Beads

TALON Magnetic Beads는 고선택적 TALON 화학과 자성 비드 분리 기술을 결합하여 his-tag 단백질을 효율적으로 정제할 수 있는 시스템입니다. 자성 입자는 마그네틱 세퍼레이터를 이용해 단백질을 빠르고 손쉽게 분리할 수 있도록 돕습니다. 비드는 Co²⁺로 미리 충전되어 있으며, 니켈 기반 수지보다 높은 특이성을 제공합니다. TALON의 독자적인 테트라덴테이트 킬레이터가 코발트를 네 개의 결합 부위에 고정시켜 금속 누출을 최소화합니다.

Highly Specific Binding & Elution

• 저분자에서 고분자까지 다양한 his-tag 단백질에 대해 높은 특이적 결합
• 소량(50–200 µl)의 용리 부피로 고농축(최대 3 mg/ml) 단백질 획득 가능
• 5% 서스펜션 형태로 공급되며, 단백질 결합 용량은 750 µg/ml

Microscale Screening

• 발현 수준 스크리닝 및 단백질-단백질 상호작용 연구에 적합
• TALON 수지를 이용한 대량 정제로의 스케일업 용이

Choice of Native or Denaturing Conditions

TALON 수지는 다양한 조건에서 안정적으로 작동하며, 네이티브 또는 변성 조건 모두에서 단백질 결합 특이성과 수율을 유지합니다.

Native Conditions

• 생물학적 활성을 유지한 채 정제 가능 (단백질이 용해성일 경우)
• 재접힘 과정 생략으로 시간 절약 및 활성 손실 최소화
• 효소 서브유닛, 보조인자, 결합 단백질의 동시 정제 가능

Denaturing Conditions

• 불용성 응집체(inclusion body) 단백질의 완전 용해 가능
• 히스티딘 태그 노출로 결합 효율 향상 및 비특이적 결합 감소
• 변성 조건에서 정제된 단백질은 필요 시 재접힘 가능
• 요소(urea)와 구아니디늄(guanidinium)이 금속 결합 경쟁으로 수율 감소 가능

Use of Reducing Agents

• β-mercaptoethanol 존재하에 정제 가능
• DTT, DTE는 사용 불가 (코발트 결합 방해)
• β-mercaptoethanol 존재 시 Ni-NTA보다 높은 수율 제공

Overview

• His-tag 단백질의 신속하고 간편한 분리
• TALON 고선택성 화학으로 높은 순도 확보
• 소량 용리 시 농축된 단백질 샘플 확보

Applications

TALON Magnetic Beads는 다양한 응용 분야에 사용 가능합니다.

• His-tag 단백질의 마이크로스케일 정제
• 단백질 구조 및 기능 연구
• X-ray 결정학용 단백질 준비
• 단백질-단백질, 단백질-DNA 상호작용 분석
• 항체 생성용 면역원 단백질 정제
• 단백질 발현 스크리닝
• TALON Resin을 이용한 대량 정제 조건 최적화

Affinity Chromatography 응용:

• His-tag 단백질의 고정화를 통한 단백질-핵산/단백질 상호작용 분석
• 결합 단백질 또는 핵산의 정제
• 항체 정제 및 리간드-수용체 상호작용 연구

Advantages

• 네이티브 또는 변성 조건 선택 가능
• 6xHis-tag 단백질의 방향성 결합으로 재현성 향상
• 비드 양 조절을 통한 결합 용량 조절 가능
• 생체분자 간 상호작용 분석에 적합한 강력한 도구

Compatibility of Common Reagents with TALON Resin

주석:
ᵃ 해당 시약을 포함한 완충용액으로 평형화 후 즉시 사용해야 하며, 장기 보관 금지
ᵇ 이온성 계면활성제는 결합에 간섭 가능
ᶜ 에탄올은 단백질 침전 및 컬럼 막힘 유발 가능
ᵈ 5–10 mM 이상의 이미다졸은 결합 경쟁으로 부적합
ᵉ Tris는 금속 이온과 약하게 결합하여 용량 감소 가능

Reagents Incompatible with TALON Resin

• DTT, DTE: 강력한 환원제는 코발트 결합 방해
• EDTA, EGTA, PEI: 금속 킬레이터로 사용 불가
  • 단, EDTA는 샘플 적용 전 겔 여과로 제거 가능

Additional Product Information

제품의 보관 조건, 구성 성분, 기술 사양 등은 Certificate of Analysis 및 Kit Components List에서 확인 가능합니다. 해당 문서는 제품 페이지의 Documents 탭에서 다운로드할 수 있습니다.