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Exonuclease I, high concentration, (20 units/μL)

제품 설명:Exonuclease I은 단일 가닥 DNA를 3→5 방향으로 가수 분해하여5-모노뉴클레오티드를 방출하고 말단 5-디뉴클레오티드는 온전한 상태로 유지합니다. 가수 분해는 연작용으로 진행되며자세히 알아보기

제품 설명:
Exonuclease I은 단일 가닥 DNA를 3→5 방향으로 가수 분해하여

5-모노뉴클레오티드를 방출하고 말단 5-디뉴클레오티드는 온전한 상태로 유지합니다. 가수 분해는 연작용으로 진행되며 3` 말단이 인산화되면 진행되지 않습니다. Exonuclease I은 관심 엔도뉴클레아제와 반응한 공유 결합적으로 닫힌 원형 단일 가닥 DNA의 엔도뉴클레오리틱 분할의 측정에 사용할 수 있습니다. 이 외에 DNA 헬리카제 활성도도 Exonuclease I을 활용하여 측정할 수 있습니다.

Exonuclease I은 특히 염기서열분석 또는 라벨링 방법을 포함하는 애플리케이션을 위한 PCR 산물의 준비에 유용합니다. 일반적으로 PCR 산물에 존재하는 여분의 프라이머와 기타 모든 불필요한 단일 가닥 DNA는 DNA 합성을 수반하는 후속 효소 반응과 간섭이 일어납니다. Exonuclease I의 가수 분해 특성은 PCR 혼합물에 존재하는 모든 단일 가닥 DNA를 분해하기 때문에 다른 애플리케이션에 PCR 산물을 더욱 효율적으로 사용할 수 있습니다. dNTP 탈인산화를 위해 Shrimp Alkaline Phosphatase(PN 78390)를 결합하면 컬럼, 젤 또는 자기 분리와 같은 또 다른 정제 방법은 사용할 필요가 없어집니다.

Exonuclease I을 사용한 PCR 세척에 대해서는 USB ExoSAP-IT 프로토콜을 참조하십시오. ExoSAP-IT를 구입하면 Exonuclease I과 SAP를 사용한 PCR 세척 방법에 대한 라이선스를 제공합니다.

특성:
분자량: 55kDa
열불활성화: 80°C에서 15분간.
말단 디뉴클레오티드까지 분해.
당화 DNA 분해.
최적 온도: 37°C

순도:
SDS-PAGE에 의해 결정된 95%보다 높은 순도. 엔도뉴클레아제, 이중 가닥 엑소뉴클레아제 및 리보핵산분해효소 오염에 대한 테스트 완료.

저장 완충액:
20mM Tris-HCI(pH 7.5), 5mM 2-메르캅토에탄올, 0.5mM EDTA, 50% 글리세롤.

분석 조건:
반응 혼합물(100μL)에는 67mM 글리신 완충액(pH 9.5), 10mM
2-메르캅토에탄올, 6.7mM MgCl2, 0.5mM 변성 DNA 및 효소가 포함되어 있습니다. 배양은 37°C에서 30분간 진행합니다.

단위 정의:
한 단위는 표준 조건일 때 37°C에서 30분간 변성 DNA로부터 산에 용해되는 뉴클레오티드 10nmol의 방출을 촉진하는 효소의 양입니다.

농도:
표준 농도: 10단위/μL, PN 70073
고농도: 20단위/μL, PN 72073

기능적 분석: Sequenase™ Version 2.0 DNA Polymerase Sequencing Kit(PN 70170)를 사용하여 염기서열분석 반응 수행 전 비결합 프라이머 분해를 위해 Exonuclease I으로 PCR 산물 처리.

참고 문헌:
GOLDMARK, P. J. AND LINN, S. (1972) J. Biol. Chem. 247, 1849-1860.
ROSAMOND, J., TELANDER, K. M. AND LINN, S. (1979) J. Biol. Chem. 254, 8646-8652.
WERLE, E., SCNEIDER C., RENNER, M., VÖLKER, M. AND FIEHN, W. (1994) Nucleic Acids Res. 22, 4354-4355.
HANKE, M. AND WINK, M. (1994) BioTechniques 17, 858-860.

사양

농도20 U/μL

효소Exonuclease

함께 사용가능한 버퍼Storage Buffer, Glycine Buffer

수량5 units

제품 유형Exonuclease I

Unit SizeEach