Thermo Fisher Scientific Exonuclease I, high concentration, (20 units/μL)

Thermo Fisher Scientific Exonuclease I, High Concentration (20 units/μL)

제품 설명

Exonuclease I은 단일 가닥 DNA를 3'→5' 방향으로 가수분해하여 5'-모노뉴클레오티드를 방출하고 말단 5'-디뉴클레오티드는 온전하게 유지합니다. 가수분해는 연속적으로 진행되며, 3' 말단이 인산화된 경우에는 진행되지 않습니다.
이 효소는 공유 결합적으로 닫힌 원형 단일 가닥 DNA의 엔도뉴클레오리틱 분할 측정 및 DNA 헬리카제 활성 측정에도 활용할 수 있습니다.

Exonuclease I은 염기서열 분석 또는 라벨링을 포함한 애플리케이션을 위한 PCR 산물 준비에 유용합니다. PCR 산물 내 여분의 프라이머 및 단일가닥 DNA를 제거하여 후속 효소 반응의 간섭을 방지합니다.

Shrimp Alkaline Phosphatase(PN 78390)와 함께 사용 시 dNTP 탈인산화를 통해 추가 정제 과정 없이 PCR 산물을 효율적으로 처리할 수 있습니다.
PCR 세척 방법에 대해서는 USB ExoSAP-IT 프로토콜을 참조하십시오.

특성

순도

• SDS-PAGE로 확인된 95% 이상 순도
• 엔도뉴클레아제, 이중 가닥 엑소뉴클레아제, 리보핵산분해효소 오염 테스트 완료

저장 완충액

20 mM Tris-HCI (pH 7.5), 5 mM 2-메르캅토에탄올, 0.5 mM EDTA, 50% 글리세롤

분석 조건

반응 혼합물(100 μL):

• 67 mM 글리신 완충액 (pH 9.5)
• 10 mM 2-메르캅토에탄올
• 6.7 mM MgCl₂
• 0.5 mM 변성 DNA
• 효소 첨가 후 37°C에서 30분간 배양

단위 정의

표준 조건(37°C, 30분)에서 변성 DNA로부터 산에 용해되는 뉴클레오티드 10 nmol 방출을 촉진하는 효소의 양을 1단위로 정의합니다.

농도

기능적 분석

Sequenase™ Version 2.0 DNA Polymerase Sequencing Kit(PN 70170) 사용 시, 염기서열 분석 전 비결합 프라이머 제거를 위해 Exonuclease I을 적용합니다.

참고 문헌

• Goldmark, P. J. & Linn, S. (1972) J. Biol. Chem. 247, 1849–1860
• Rosamond, J., Telander, K. M. & Linn, S. (1979) J. Biol. Chem. 254, 8646–8652
• Werle, E. et al. (1994) Nucleic Acids Res. 22, 4354–4355
• Hanke, M. & Wink, M. (1994) BioTechniques 17, 858–860

사양