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Takara Helper-free expression system (CMV promoter)
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AAVpro Helper Free System은 헬퍼 바이러스 없이 AAV 입자를 제작하는 키트로, CMV 프로모터를 통해 강력하고 지속적인 유전자 발현이 가능합니다. HEK293T 세포에 3종 플라스미드를 공동 형질감염하여 간편하게 AAV 입자를 생산할 수 있습니다. 생체 내(in vivo) 유전자 도입 시 AAVpro Purification Kit로 정제 필요.
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- 4개 옵션
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- Takara
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Takara 6230 AAVpro® Helper Free System (AAV2), 20 ug Each pk판매 단위 pk ·
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Takara 6650 AAVpro® Helper Free System (AAV5), 20 ug each pk판매 단위 pk ·
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Takara 6651 AAVpro® Helper Free System (AAV6), 20 ug each pk판매 단위 pk ·
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Takara 6673 AAVpro® Helper Free System (AAV1), 20 ug each pk판매 단위 pk ·
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Takara · Takara Helper-free expression system (CMV promoter)
AAVpro Helper Free Expression System (CMV Promoter)
AAVpro Helper Free Systems는 헬퍼 바이러스 없이 AAV 입자를 제조할 수 있는 키트입니다. 생성된 AAV 입자는 강력하고 지속적인 CMV 프로모터를 통해 포유류 세포 또는 개체 수준에서 목표 유전자의 일시적 발현을 유도할 수 있습니다.
생체 내(in vivo) 유전자 도입 시에는 반드시 AAVpro Purification Kit를 이용한 정제가 필요합니다.
AAV 입자 제조 방법
각 키트에는 HEK293T 세포를 형질감염하여 재조합 AAV 입자를 제조하는 데 필요한 3종의 플라스미드가 포함되어 있습니다.
HEK293T 세포를 세 가지 플라스미드로 공동 형질감염 후, 2–3일 뒤 포함된 AAV Extraction Solution을 사용하여 입자를 추출합니다.
이 추출 용액은 단백질 및 핵산 오염을 최소화하면서 간단하고 효율적인 AAV 입자 분리를 가능하게 합니다.
구성 플라스미드
| 플라스미드 | 설명 |
|---|---|
| pAAV-CMV | 목표 유전자(GOI)를 클로닝하기 위한 플라스미드로 CMV 프로모터와 두 개의 ITR을 포함합니다. |
| pRC (pRC1, pRC2-mi342, pRC5, pRC6) | AAV의 Rep 및 Cap 유전자를 포함합니다. pRC2-mi342는 인간 microRNA인 has-miR-342 발현 카세트를 포함하여 일반 pRC2 대비 약 2배 높은 AAV 타이터를 제공합니다. |
| pHelper | 효율적인 AAV 생산에 필요한 adenovirus 유래 E2A, E4, VA 유전자를 포함합니다. |
참고 사항
- pAAV-CMV 벡터에 클로닝되는 목표 유전자의 크기는 2.5 kb 미만이어야 합니다. 이는 AAV 입자에 포장 가능한 DNA 크기 제한 때문입니다.
- 패키징 플라스미드(pRC 및 pHelper)는 대용량(1 mg) 단위로 별도 판매됩니다. 대규모 in vivo 연구에 적합합니다.
(AAVpro Packaging Plasmid)
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