
Norgen Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Mini Kit
소변 시료에서 세포유리 순환 및 바이러스 핵산(DNA/RNA)을 신속하고 효율적으로 정제하는 키트. 모든 크기의 DNA/RNA(마이크로RNA 포함)를 한 번에 추출 가능. 페놀 처리나 carrier RNA 불필요. 신선·냉동·보존 소변 모두 호환되며, PCR, qPCR, NGS 등 다양한 분석에 활용 가능.
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Norgen Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Mini Kit
제품 개요
Norgen의 Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Kits는 다양한 소변 시료에서 총 순환 핵산(DNA 및 RNA)을 정제하는 신속하고 신뢰성 높은 방법을 제공합니다.
정제 과정은 Norgen 고유의 스핀 컬럼 크로마토그래피 기술을 기반으로 하며, 고품질·고순도·저억제율의 핵산을 얻을 수 있습니다.
특징 및 장점
- 모든 크기의 순환 DNA, 순환 및 엑소좀 RNA, microRNA, 바이러스 DNA/RNA를 한 번의 엘루션으로 정제
- 다양한 소변 입력량(250 µL~30 mL)에 대응
- 페놀 추출 또는 carrier RNA 불필요
- GC 함량이나 크기에 관계없이 RNA를 균일하게 결합 및 엘루션
- 유연한 엘루션 볼륨(50~100 µL)
- 신선, 냉동, 보존 소변 시료 모두 호환
- 정제된 RNA는 Small RNA Sequencing 등 다양한 downstream 분석에 적합
- Norgen의 독자적 수지 매트릭스를 이용한 스핀 컬럼 방식
제품 설명
이 키트는 소변에서 세포유리 순환 DNA, RNA(엑소좀 RNA 포함) 및 바이러스 DNA/RNA를 빠르고 간편하게 정제할 수 있는 제품입니다.
페놀/클로로포름 또는 프로테아제 처리가 필요하지 않으며, 50~100 µL의 유연한 엘루션 볼륨을 제공합니다.
정제된 핵산은 PCR, qPCR, RT-PCR, 메틸화 분석, Southern/Northern blot, RNase protection, primer extension, expression array, NGS 등 다양한 분석에 사용할 수 있습니다.
배경
최근 연구에 따르면 소변 내 세포유리 순환 핵산(cfc-DNA, cfc-RNA 및 엑소좀 RNA)은 암 조기 진단, 질병 모니터링, 태아 DNA 검출 등 바이오마커로서 가치가 있습니다.
소변은 비침습적 시료로 대량 확보 및 반복 채취가 가능하며, 단백질 농도가 낮아 핵산 정제가 용이합니다.
또한 HIV 등 병원체 감염 위험이 낮고, 혈액이나 조직 시료 대비 안정적입니다.
키트 종류 및 입력량
| 키트명 | Cat. No. | 입력 소변량 범위 |
|---|---|---|
| Mini Kit | 59900 | 250 µL – 2 mL |
| Midi Kit | 60000 | 2 mL – 10 mL |
| Maxi Kit | 60100 | 10 mL – 30 mL |
Kit Specifications
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| Minimum Urine Input | 250 μL |
| Maximum Urine Input | 2 mL |
| Size of Nucleic Acid Purified | All sizes, including miRNA and small RNA (<200 nt) |
| Elution Volume | 50–100 μL |
| Time to Complete 10 Purifications | 25–30 minutes |
| Average Yields | Variable depending on specimen |
Storage Conditions and Product Stability
모든 버퍼는 실온에서 밀봉 보관하며, 출하일로부터 2년간 안정적입니다.
염 침전이 발생할 경우, Lysis Buffer A를 60°C에서 20분간 가열 후 사용을 권장합니다.
구성품
| Component | Cat. 59900 (50 preps) | Cat. 60000 (20 preps) | Cat. 60100 (10 preps) |
|---|---|---|---|
| Binding Solution K | 25 mL | 75 mL | 1×75 mL + 1×25 mL |
| Lysis Buffer A | 30 mL | 20 mL | 20 mL |
| Wash Solution A | 18 mL | 18 mL | 18 mL |
| Elution Buffer F | 6 mL | 6 mL | 6 mL |
| Mini Spin Columns | 50 | 20 | 10 |
| Midi Spin Columns | - | 20 | - |
| Maxi Spin Columns | - | - | 10 |
| Collection Tubes | 50 | 20 | 10 |
| Elution Tubes (1.7 mL) | 50 | 20 | 10 |
| Product Insert | 1 | 1 | 1 |
Supporting Data
Figure 1. Purification of cell-free circulating DNA from different urine volumes
Norgen Mini Kit(Cat# 59900)을 이용하여 500 µL, 1 mL, 2 mL 소변에서 DNA를 정제하였으며, 5S rRNA gene Ct 값은 입력량 증가에 따라 선형적으로 감소함.
이미지 내 데이터 (OCR):
| Urine Volume | Average Ct. Value |
|---|---|
| 0.5 mL | 28.05 |
| 1 mL | 27.18 |
| 2 mL | 26.26 |
Figure 2. Linearity of DNA purified from increasing urine volumes
정제된 DNA의 상대량과 직선성 비율을 분석한 결과, 입력량 증가에 따라 선형성이 유지됨.
| Urine Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---|---|---|
| 0.5 mL | 0.36 | 100 |
| 1 mL | 0.66 | 91 |
| 2 mL | 1.25 | 95 |
Figure 3. Inhibitor-free DNA
PCR 입력량(2, 4, 8 µL) 증가 시 Ct 값이 감소하여, 정제된 DNA가 PCR 억제물질이 없음을 확인.
Figure 4. Purification of cell-free circulating RNA and exosomal RNA
RT-qPCR 결과, 입력량 증가 시 Ct 값이 감소하여 RNA 정제 효율이 선형적으로 향상됨.
| Urine Volume | 5S rRNA Ct (A) | miR-21 Ct (B) |
|---|---|---|
| 0.5 mL | 23.38 | 26.23 |
| 1 mL | 22.50 | 25.34 |
| 2 mL | 21.63 | 24.45 |
Figure 5. Linearity of RNA purified from increasing urine volumes
RNA 정제의 상대량 및 선형성 분석 결과:
Graph A (5S rRNA transcript)
| Urine Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---------------|----------------|----------------|
| 0.5 mL | 0.09 | 100 |
| 1 mL | 0.17 | 92 |
| 2 mL | 0.31 | 92 |
Graph B (miR-21)
| Urine Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---------------|----------------|----------------|
| 0.5 mL | 0.13 | 100 |
| 1 mL | 0.24 | 95 |
| 2 mL | 0.44 | 92 |
Documentation
Protocols
- 59900 - Mini Kit Protocol (50 Preps)
- 60000 - Midi Kit Protocol (20 Preps)
- 60100 - Maxi Kit Protocol (10 Preps)
Safety Data Sheets
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