
Norgen 16S V1-V2 Library Preparation Kit for Illumina
Illumina 플랫폼용 16S V1-V2 라이브러리 준비 키트로 다양한 시료에서 DNA를 빠르고 효율적으로 준비 가능. 4시간 내 라이브러리 완성, 최대 384개의 듀얼 인덱스 사용 가능. 메타게놈 분석 및 마이크로바이옴 연구에 최적화.
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Norgen 16S V1-V2 Library Preparation Kit for Illumina
SKU: 70100
본 키트는 Illumina 플랫폼에서 차세대 시퀀싱(NGS)에 사용되는 16S V1-V2 앰플리콘 라이브러리 준비에 필요한 모든 시약과 구성품을 제공합니다. 프라이머, 효소 믹스, 인덱스, 버퍼 등이 포함되어 있으며, AMPure XP Magnetic Beads(사용자 제공)를 이용한 PCR 정제 절차가 포함되어 있습니다.
라이브러리 준비 워크플로우는 다양한 시료(대변, 토양, 물, 타액, 식물, 소변, 피부, 질 스왑, 볼 스왑, 비강 스왑, 혈장/혈청 등)의 정제된 DNA 입력에 사용할 수 있습니다.
특징 및 장점
- 다양한 시료로부터 분리된 DNA에 최적화된 프로토콜
- 단순하고 빠른 워크플로우: 5시간 이내 라이브러리 준비 가능
- Norgen 메타게놈 분석 워크플로우의 구성 요소
- 최대 384개의 고유 듀얼 인덱스 라이브러리 준비 가능
Sample type purification kit guide
워크플로우 요약
입력 DNA는 먼저 16S rRNA를 암호화하는 V1-V2 영역을 증폭하는 타깃 PCR을 수행합니다.
PCR 후 AMPure XP 비드를 이용해 정제한 뒤, 듀얼 인덱스 프라이머를 사용한 제한 사이클 PCR로 인덱싱합니다.
바코드 어댑터가 부착된 앰플리콘은 다시 정제 후, 정량화 및 풀링, 시퀀싱을 진행합니다.
라이브러리 준비 시간
Total Library Prep Time: 4 hrs
| 단계 | 시간 | 과정 |
|---|---|---|
| 1 | 2.5 hrs | Amplicon PCR |
| 2 | 30 min | PCR Clean Up |
| 3 | ~30 min | Index PCR |
| 4 | 30 min | PCR Clean Up 2 |
| 5 | (시간 미표기) | Quantification & Pooling |
| 6 | (시간 미표기) | Library Denaturing & Sequencing |
Supporting Data
Figure 1. 16S V1-V2 PCR1 Amplification
Norgen’s FastRunner DNA Ladder
Stool DNA No Template
1 2 3 1 2 3
bps: 2000, 1500, 1000, 750, 500, 300, 150
Figure 2. 16S V1-V2 Indexed Libraries
Norgen’s FastRunner DNA Ladder
Stool DNA
bps: 2000, 1500, 1000, 750, 500, 300
1 2 3
Figure 3. BioAnalyzer Trace of the 16S V1-V2 Indexed Library
| 축 구분 | 단위 | 값 |
|---|---|---|
| 세로축 | FU | 형광 단위 |
| 가로축 | bp | 35, 100, 150, 200, 300, 400, 500, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000, 10000 |
| 피크 라벨 | bp | 35, 158, 461, 497, 506, 546, 658, 817, 941, 1485, 2044, 4635, 7429, 10380, 13689 |
| 제목 | MGX-MOCK-REPLICATE-C-V1V2 |
제품 세부 정보
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| 최소 시작 물질량 | 2.5 µL의 DNA (5 ng/µL) |
| 라이브러리 준비 완료 시간 | 약 4시간 |
보관 조건 및 안정성
Norgen의 16S V1-V2 Library Prep Kit for Illumina는 24 prep 키트(1박스) 또는 96 prep 키트(2서브 구성품)로 배송됩니다.
모든 키트는 도착 즉시 -20°C에 보관해야 하며, 지정된 조건에서 최소 1년 동안 안정성을 유지합니다.
| Step | Component | Cat. 70100 (24 preps) | Cat. 70110~70140 (96 preps) |
|---|---|---|---|
| Amplicon PCR (PCR 1) | MGX Master Mix | 330 µL | 1,320 µL |
| 16S V1-V2 Primer Mix | 70 µL | 280 µL | |
| Index PCR (PCR 2) | Indexing Master Mix | 660 µL | 2 × 1,320 µL |
| N7xx Index Primer | 50 µL | 50 µL | |
| S5xx Index Primer | 70 µL | 70 µL | |
| PCR Clean-Up | Resuspension Buffer | 2 × 1,250 µL | 2 × 5,000 µL |
| Nuclease-free water | 1,250 µL | 6,000 µL |
문서 자료
- Protocol (70100~70140) - 16S V1-V2 Library Prep Kit Illumina
- SDS - 70100 16S V1-V2 Library Preparation Kit for Illumina
인용 문헌
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| 제목 | Characterization of the urogenital microbiome in Miniature Schnauzers with and without calcium oxalate urolithiasis |
| 저널 | Journal of Veterinary Internal Medicine, 2022 |
| 저자 | Emily L. Coffey, Andres M. Gomez, Erin N. Burton, Jennifer L. Granick, Jody P. Lulich, Eva Furrow |
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