Takara Helper virus-free preparation of AAV particles to deliver Cas9 and sgRNA

Overview

• Cas9 유전자와 sgRNA의 바이러스 전달을 통해 증식 및 비증식 포유류 세포에서 유전자 편집 가능
• AAV를 이용한 Cas9 전달은 게놈 통합 및 지속적 발현을 방지하여 오프타깃 효과 감소
• 포장 플라스미드에서 human microRNA miR-342 발현으로 AAV 역가 향상
• 효율적인 AAV2 바이러스 입자 분리를 위한 AAV Extraction Solution 포함

AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free Systems (with S. pyogenes Cas9)

• SpCas9 유전자는 pAAV-Guide-it-Up과 pAAV-Guide-it-Down 플라스미드에 분할되어 있으며, 1.6 kb 상동 영역을 통해 세포 내 재조합으로 완전한 SpCas9 형성
• SpCas9은 PAM 서열 NGG(N은 임의 염기)를 인식함
• pAAV-Guide-it-Down 플라스미드는 선형화되어 제공되어, sgRNA의 단일 단계 클로닝을 용이하게 하고 재결합에 의한 백그라운드 감소

AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free Systems (with S. aureus Cas9)

• SaCas9 유전자는 sgRNA 발현 카세트를 포함하는 단일 플라스미드 pAAV-Guide-it-1에 존재
• SaCas9은 PAM 서열 NNGRR(T)(N: 임의 염기, R: A 또는 G, (T): 선호됨)을 인식함
• pAAV-Guide-it-1 플라스미드는 선형화되어 제공되어, sgRNA 단일 단계 클로닝을 용이하게 하고 재결합에 의한 백그라운드 감소

Applications

• 사용자 정의 sgRNA 및 Cas9을 이용한 포유류 세포의 CRISPR/Cas9 기반 유전자 편집
• AAV 기반 전달 시스템으로 난전달성 세포에서도 효율적 적용 가능

Components

Additional Product Information

• 제품의 저장 조건, 구성품 및 기술 사양은 Certificate of Analysis를 참조
• Kit Components List에서 세부 구성품 확인 가능
• 위 문서들은 Documents 탭에서 다운로드 가능