##### Description
높은 정확성을 요하는 gene cloning에 꼭 필요한 Proof-reading 기능을 가지며 낮은 에러율을 보이는 고순도의 pfu DNA Polymerase의
PCR core Kit
- • 높은 정확성
- Proof-reading 활성이 있어 장편의 DNA template 증폭 가능
- 유전자 cloning 및 발현과 같은 정확성을 요구하는 실험에 최적
- • 낮은 error rate
- 3’→5’ exonuclease 활성이 있는 대표적인 내열성의 proof-reading 효소로서 1x10
-6의 error rate를 가짐
- • Blunt-end Cloning 가능
i-pfu DNA Polymerase는 3’→5’ exonuclease 활성이 있는 대표적인 내열성의 Proof-reading 효소로서, 높은 fidelity를 가지고 있으며 1x10-6(13,000 base pair당 한 개의 error rate)의 error rate를 보장하는 제품입니다. pfu DNA Polymerase가 가지는 proof-reading 활성은, DNA Polymerase가 중합반응을 진행하는 중에 mismatched(상보적이지 않은) nucleotide가 끼어든 경우 이를 제거하고 상보적인 nucleotide로 교정할 수 있다는 것입니다. 이러한 활성은 Taq DNA Polymerase
보다 더 정확한 염기서열의 PCR 산물을 얻을 수 있도록 하기도 하지만, Taq DNA Polymerase에 비하여 더 긴 DNA template를 증폭할 수 있도록 해줍니다.
DNA 합성과정 중 DNA Polymerase가 template로부터 떨어져 나오게 되는 가장 큰 원인이 mismatched nucleotide가 중합반응을 방해하기 때문인데, Pfu DNA Polymerase의 경우 이를 제거할 수 있기 때문에 중합반응을 계속할 수 있게 되며, 일반적인 Taq으로는 증폭이 어려운 긴 size 의 PCR(up to ~ 30 kb)에 적합한 효소로 일반 Taq DNA Polymerase에 비해 높은 fidelity와 proof reading 기능을 가지고 있습니다.
그 결과 Taq DNA Polymerase보다 더 긴 DNA fragment (최대 30kb)를 증폭할 수 있는 것입니다. 이런 특성 때문에 Pfu DNA Polymerase가 중합효율이 떨어져
중합에 더 많은 시간을 필요로 함에도 불구하고 유전자 cloning 및 발현과 같이 정확성이 요구되는 실험에는 널리 이용되고 있습니다. 이러한 i-pfu DNA Polymerase는 Taq DNA Polymerase와는 달리 blunt-end의 증폭산물을 만듭니다. 따라서 증폭산물을 클로닝하기 위해서는 blunt-end를 갖는 vector에 클로닝 할 수 있으며
T vector 클로닝 하기 위해서는 염기 A를 부가적으로 붙여 주어야 합니다.
