Takara In-Fusion Snap Assembly bundles for seamless DNA cloning

Takara In-Fusion Snap Assembly Bundles for Seamless DNA Cloning

제품 개요

In-Fusion Snap Assembly 제품은 PCR로 증폭된 DNA 프래그먼트를 단일 15분 반응으로 임의의 선형화된 벡터에 방향성 있고 무결점으로 클로닝할 수 있는 기술을 제공합니다.
제한효소 절단, 라이게이션, 인산화, 블런트엔드 폴리싱 등의 추가 처리가 필요하지 않습니다.
클로닝 효율은 95% 이상으로, 신뢰성 높은 클론 확보 및 고처리량(High-throughput) 실험으로의 확장이 가능합니다.

기술적 특징

• Subcloning 불필요: 원하는 삽입물을 최종 벡터에 직접 클로닝 가능
• 고효율: 0.5 kb ~ 34 kb 범위의 다양한 DNA 크기에서 95% 이상 효율
• Seamless 클로닝: 제한효소 절단 또는 TA 클로닝 시 발생하는 불필요한 염기쌍 잔여 없음
• 유연한 설계: 단일 또는 다중 DNA 프래그먼트를 한 번의 반응으로 클로닝 가능
• Site-directed mutagenesis: 삽입, 결실, 치환 등 다양한 변이 생성에 적용 가능

* Stellar Competent Cells, PrimeSTAR Max Polymerase, NucleoSpin Gel and PCR Clean-up kit 사용 시 최적 효율 달성

작동 원리

In-Fusion Snap Assembly Master Mix는 라이게이스 없이 PCR 생성물과 선형화된 벡터를 15 bp 오버랩을 이용해 정확히 융합합니다.
이 오버랩은 사용자 정의 프라이머 설계를 통해 생성할 수 있습니다.
Master Mix는 선형 DNA의 3' 말단에서 뉴클레오타이드를 제거하여 상보적인 염기쌍이 결합하도록 유도하며, 이를 통해 DNA 조각이 정확히 연결됩니다.
이 방식은 단일 또는 다중 프래그먼트를 한 번에 클로닝할 수 있으며, 추가적인 서브클로닝 없이 다양한 응용이 가능합니다.
응용 예로는 돌연변이 생성, 유전자 합성, 유전자 디자인, 도메인 교체 및 수정 등이 있습니다.

구성품

모든 In-Fusion Snap Assembly 제품은 Master Mix 및 대조 실험용 시약을 포함합니다.
Master Mix는 액상 형태의 5X 효소 프리믹스로 제공되며, 키트 크기에 따라 20–100 μl 알리쿼트로 구성됩니다.

응용 분야

• PCR 클로닝
• 고처리량 클로닝
• 다중 프래그먼트 클로닝
• 유전자 합성
• 유전자 디자인
• 돌연변이 생성
• 도메인 교체 및 수정

추가 정보

제품의 보관 조건, 구성 성분 및 기술 사양은 Certificate of Analysis에서 확인할 수 있습니다.
Kit Components List는 Documents 탭에서 다운로드 가능합니다.