Intron i-Taq™ DNA Polymerase

제품 설명

Template 종류 및 반응조건에 관계없이 안정적이고 효율적인 DNA 증폭을 나타내는 고순도의 i-Taq™ PCR core Kit

• 94 KDa의 thermostable DNA polymerase
• 고순도의 Taq DNA Polymerase
  • PCR 오염원으로 작용할 수 있는 대장균 유래 단백질 및 DNA 제거
• Template 종류 또는 반응조건에 관계없이 최상의 Polymerase 활성을 나타낼 수 있도록 Buffer 최적화
• 재현성 높은 결과 획득
• 클로닝된 DNA에서 인체 genomic DNA에 이르기까지 다양한 DNA에 적용 가능

i-Taq™ DNA Polymerase는 Thermus aquaticus (strain YT1)의 polymerase gene을 cloning하여 E. coli*에 발현시킨 94 KDa의 thermostable DNA Polymerase입니다.
PCR 오염원으로 작용할 수 있는 *E. coli 유래 단백질 및 DNA를 제거하여 고순도로 정제되어 안정적이면서 효율적인 DNA 증폭이 가능합니다.
Genomic DNA, cDNA 등으로부터 최대 5 Kb까지 증폭이 가능합니다.

PCR(Polymerase Chain Reaction)은 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관 내에서 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법으로, 아주 적은 양의 DNA를 이용해 많은 양의 DNA를 합성할 수 있습니다.
이 기술은 분자생물학, 의학, 법의학, 식품 및 환경위생, 동식물 검사 등 다양한 분야에서 널리 사용되고 있습니다.

중합효소 연쇄반응을 통해 in vitro 상에서 특정 부위의 DNA를 10⁵~10⁸배까지 수 시간 내에 증폭시킬 수 있으며, 이렇게 증폭된 DNA는 다양한 실험 및 의학 연구에 활용됩니다.
초창기에는 대장균 DNA Polymerase를 사용하였으나, 변성 시마다 효소를 보충해야 하는 번거로움이 있었습니다.
그러나 Thermus aquaticus 유래 내열성 DNA Polymerase의 도입으로 효소 보충 없이 연속적인 PCR 수행이 가능해졌으며, PCR은 분자생물학의 핵심 기술로 자리 잡았습니다.

PCR 반응 단계

1. 변성(Denaturation)
   DNA를 가열하여 두 가닥을 분리합니다. 변성 온도는 DNA의 G+C 함량과 길이에 따라 달라집니다.

2. 결합(Annealing)
   Primer가 주형 DNA에 결합하는 단계입니다.

   • 온도가 너무 높으면 결합이 약해져 산물이 적어집니다.
   • 온도가 너무 낮으면 비특이적 결합이 발생할 수 있습니다.

3. 신장(Elongation)
   열에 강한 DNA 중합효소가 주형 DNA를 이용해 새로운 DNA를 합성합니다.

i-Taq™ DNA Polymerase는 template 종류나 반응 조건에 관계없이 최적의 활성을 나타내도록 buffer가 조성되어 있어 재현성 높은 결과를 제공합니다.
본 효소로 증폭된 PCR 산물은 대부분 3'-말단에 염기 A가 하나 추가되어 있으므로 T-vector 클로닝에 바로 사용할 수 있습니다.
또한 Klenow DNA Polymerase나 T4 DNA Polymerase로 말단을 채워 blunt-end vector에도 클로닝할 수 있습니다.