Thermo Fisher Scientific GeneArt Type IIs Assembly Kit, Bsa I

Invitrogen™ GeneArt™ Type IIs Assembly Kit, Bsa I

GeneArt® Type IIs Assembly Kit (Bsa I)은 최대 8개의 DNA 단편을 단일 반응에서 절단과 연결을 동시에 수행하여 무흠집(seamless)으로 조립할 수 있는 키트입니다. Type IIs 제한효소인 Bsa I을 이용하여 Golden Gate 클로닝과 유사한 기술을 적용하며, 원하는 순서로 여러 단편을 호환 벡터에 조립할 수 있습니다. 이 방법은 상동 재조합에 의존하지 않기 때문에 재배열 위험이 낮고, 최종 산물의 염기서열 확인이 최소화됩니다.

주요 특징

• 여러 DNA 단편을 순서에 맞게 무흠집으로 조립
• 상동 재조합 없이 반복 서열 클로닝 가능
• TAL, 유전자 변이체, 반복 서열 조립에 적합
• 맞춤형 클로닝 및 발현 벡터 제작 가능
• 최종 산물의 염기서열 확인 최소화
• 3가지 Type IIs 제한효소(Aar I, Bsa I, Bbs I) 버전 제공

Type IIs Cloning

Type IIs 클로닝은 in vitro 조립 반응과 E. coli 형질전환의 두 단계로 구성됩니다.
Bsa I 제한효소는 비대칭 DNA 서열을 인식하고 인식 부위로부터 일정 거리에서 절단합니다. DNA 단편 양쪽에 Bsa I 인식 부위를 설계하면 절단 후 상보적인 오버행이 생성되어, 인식 부위가 제거된 무흠집 연결이 가능합니다.
키트에는 이러한 접근법에 최적화된 목적 벡터 pType IIs가 포함됩니다.

클로닝 효율, 유연성 및 정밀도

클로닝 효율은 DNA 단편의 크기, 최종 분자의 총 크기(최대 13 kb), 단편의 품질과 특이성에 따라 달라집니다.

일반적인 클로닝 효율 예시:

• 1 kb 단편 5개 조립 시: >95%
• 1 kb 단편 8개 조립 시: >60%
• 동일한 1 kb 단편 2개 조립 시: >85%

In Silico 클로닝 설계 지원

GeneArt® Primer and Construct Design Tool을 통해 실험 설계를 간소화할 수 있습니다.
이 도구는 적합한 GeneArt® 키트를 추천하고, 단편 및 프라이머 설계를 지원하며, 벡터의 그래픽 표현과 GenBank 형식의 주석 서열을 제공합니다.

디자인 도구: GeneArt® Primer and Construct Design Tool

추가 추천 제품

• Zero Blunt® TOPO® PCR Cloning Kit (Cat. No. 450245)
• Zero Blunt® TOPO® PCR Cloning Kit with One Shot® TOP10 Cells (Cat. No. K280020)
• One Shot® MAX Efficiency™ DH10B™ T1 Phage Resistant Cells (Cat. No. 12331-013)

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