Thermo Fisher Scientific GeneArt Type IIs Assembly Kit, Aar I

GeneArt™ Type IIs Assembly Kit, Aar I

Invitrogen™ GeneArt™ Type IIs Assembly Kit, Aar I는 최대 8개의 DNA 단편을 한 번의 반응으로 절단 및 연결하여 무흔적(seamless) 클로닝을 가능하게 합니다.
이 키트는 Type IIs 제한효소인 _Aar I_을 사용하여 Golden Gate 클로닝과 유사한 방식으로 다중 DNA 단편을 사전 정의된 순서로 원하는 벡터에 조립할 수 있습니다.
Type IIs 조립은 상동 재조합에 기반하지 않으므로 재배열 위험이 낮으며, 최종 생성물의 염기서열 확인이 최소화됩니다.

주요 특징

• 여러 DNA 단편을 원하는 순서로, 호환 가능한 벡터에 무흔적 조립 가능
• 상동 또는 반복 서열 클로닝 시 재조합 및 재배열 위험 최소화
• TAL, 유전자 변이체, 반복 서열 조립에 적합
• 맞춤형 클로닝 및 발현 벡터 제작 가능
• 최종 생성물의 염기서열 확인 최소화
• Aar I, Bsa I, Bbs I 세 가지 Type IIs 효소 버전 중 선택 가능

Type IIs 클로닝 개요

GeneArt® Type IIs 클로닝은 in vitro 조립 반응과 E. coli 형질전환의 두 단계로 구성됩니다.
Aar I 제한효소는 비대칭 서열을 인식하고 인식 부위로부터 일정 거리에서 절단하여 상보적인 오버행을 생성합니다.
이 오버행은 절단 후 인식 부위가 제거된 상태로 연결되어, 원래 제한효소 절단 부위가 없는 매끄러운 접합부를 형성합니다.
키트에는 이 접근법에 최적화된 목적 벡터 pType IIs가 포함되어 있습니다.

클로닝 효율, 유연성 및 정밀성

클로닝 효율에 영향을 미치는 주요 요인은 DNA 단편 크기, 최종 분자의 총 크기(약 10 kb 이하), 단편의 품질 및 특이성입니다.

일반적인 클로닝 효율 예시:

• 1 kb 단편 5개 조립 시 >95%
• 1 kb 단편 8개 조립 시 >60%
• 1 kb 동일 단편 2개 조립 시 >85%

in silico 클로닝 설계 지원

GeneArt® Primer and Construct Design Tool을 통해 적절한 키트를 선택하고, 실험 설계를 시각화하며, 필요한 경우 프라이머를 설계할 수 있습니다.
해당 도구는 VectorNTI® 호환 GenBank 형식의 주석 시퀀스를 제공합니다.

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