Thermo Fisher Scientific ExoSAP-IT PCR Product Cleanup

Applied Biosystems™ ExoSAP-IT™ PCR Product Cleanup

ExoSAP-IT™ PCR Product Cleanup은 DNA 염기서열분석 및 단일 뉴클레오티드 다형성(SNP) 분석 등 다운스트림 애플리케이션용으로 빠르고 간단한 PCR 세척을 위해 설계된 시약입니다.

특징 및 장점

• PCR 검체 보존 — 짧고 긴 PCR 산물 모두에 대한 100% 회수율
• 단일 튜브, 단일 단계 세척 — ExoSAP-IT 시약을 직접 PCR 산물에 첨가
• 스핀 컬럼 제거 — 시간과 비용 절감, 수율 증가
• 오염 프라이머 및 dNTP 제거 — 다운스트림 애플리케이션에 간섭 없음
• 확장성 — 고처리량 정제에 경제적
• 간단한 처리 — 자동화 공정에 적합, 비드 및 여과 장치 불필요
• 폐기물 최소화 — 컬럼 방식 대비 적은 폐기물 발생

작동 원리

PCR 증폭 후 남아 있는 프라이머와 dNTP는 염기서열분석에 간섭을 일으킬 수 있습니다. ExoSAP-IT 시약은 이러한 오염물을 제거하기 위해 Exonuclease I과 Shrimp Alkaline Phosphatase(SAP) 두 가지 효소를 사용합니다.

• Exonuclease I: 잔류 단일 가닥 프라이머 및 불필요한 단일 가닥 DNA 제거
• SAP: 잔류 dNTP 제거

사용 방법

1. PCR 산물에 ExoSAP-IT 시약을 직접 첨가
2. 37°C에서 15분간 배양
3. 80°C에서 15분간 가열하여 효소 비활성화

총 30분 내에 염기서열분석 또는 SNP 분석 준비가 완료됩니다.

장점 요약

• 단일 단계, 최소한의 수작업
• 젤, 컬럼, 침강, 여과, 비드 및 자기 분리 과정 불필요
• 짧고 긴 PCR 산물 모두에서 100% 회수율
• 형광 또는 방사선 기반 DNA 분석에 적합

참고 문헌

• DUGAN, K. A. et al. (2002) J. Forensic Sci 47, 811–818.
• HANKE, M. and WINK, M. (1994) BioTechniques 17, 858–860.
• MU, J. et al. (2002) Nature 418, 323–326.
• SILVA, W. A. Jr. et al. (2001) BioTechniques 30, 537–542.
• WERLE, E. et al. (1994) Nucleic Acids Res. 22, 4354–4355.

제품 사양