서비스 문의 : crlKorea_biologics@crl.com

Viral Safety Testing

Charles River는 생물의약품의 내인성 및 외인성 바이러스 제제를 검출하기 위해 in vivo, in vitro 및 생화학적 유해 인자 검사를 제공합니다. 이러한 검사는 생물의약품의 바이러스 안전성을 평가하는 데 필수적입니다.

바이러스 안전성 평가

Charles River는 다양한 바이러스 안전성 평가 서비스를 제공합니다. 이러한 서비스는 제품의 특성과 요구 사항에 따라 맞춤형으로 설계됩니다. 긴급한 결과가 필요한 경우를 위해 신속한 테스트 서비스도 제공됩니다.

In Vivo 검사

GMP 준수 in vivo 생물안전성 검사는 아일랜드와 미국(매사추세츠주 Shrewsbury 및 Wilmington)에서 수행되며, 관련 규제 요구 사항을 충족하도록 설계된 테스트 프로토콜을 사용합니다. 주요 서비스는 다음과 같습니다:

• 마우스, 햄스터, 랫드 항체 생성(MAP, HAP, RAP) 테스트
• 백신 테스트를 위한 특정 검사를 포함한 외인성 바이러스 검사
• 무흉선 누드 마우스를 이용한 84일 및 120일 종양형성 테스트
• 세포 기반 In Vitro 외인성 인자 검사

특정 오염 위험을 해결하고 적절한 맞춤형 검사를 개발하기 위해 당사에 문의하시기 바랍니다. 주요 서비스는 다음과 같습니다:

• 레트로바이러스 검출 검사 : 이 검사는 amphotropic 및 xenotropic 마우스 백혈병 바이러스와 같은 특정 헬퍼 타입 바이러스를 검출하도록 설계되었습니다. 샘플은 감수성 세포에서 증폭된 후 S+L- 포커스 검사를 통해 검출됩니다.
  14일 및 28일 외인성 인자 검사: 낮은 수준의 바이러스 오염 물질을 검출하기 위해 다양한 세포주와 바이러스 조합을 사용하여 14일 및 28일 동안 수행됩니다.
• 돼지 및 소 외인성 인자 검사 : 이 검사는 9 CFR 규정을 준수하여 태아 소 혈청, 돼지 트립신, 돼지 펩신, 세포 프리 상청액, 세포 용해물 및 기타 소 및 돼지 제품에서 바이러스 제제를 검출합니다.
  XC 플라크 검사: 이 검사는 ecotropic 마우스 백혈병 바이러스를 정량화하기 위한 확장 및 직접 XC 플라크 검사를 제공합니다.
• S+L- 포커스 검사 : 직접 검출 또는 레트로바이러스 검출을 위한 엔드포인트로 사용됩니다.
  전자현미경(EM): 당사의 Pathology Associated 부서에서 GLP 준수 하에 수행되며, 투과 및 주사 전자현미경 서비스를 제공합니다.
• 공배양 검사 : 테스트 세포를 감수성 기질 세포와 함께 배양하여 직접 감염 연구로는 검출되지 않는 잠재적 감염성 레트로바이러스를 분리 및 증폭합니다.
  유전자 치료 벡터 검사

아데노바이러스 검출 검사(복제 가능 바이러스): 생산 과정에서 복제 가능 아데노바이러스(RCA)가 생성될 수 있습니다. 이 검사는 감수성 비보완 세포주에서 RCA를 증폭한 후 아데노바이러스 관련 세포병변 효과를 관찰합니다.
아데노부속 바이러스 검출 검사(복제 가능 바이러스): 생산 과정에서 복제 가능 아데노부속 바이러스(rcAAV)가 생성될 수 있습니다. 이 검사는 감수성 세포주에서 헬퍼 바이러스와 공동 감염하여 rcAAV를 증폭한 후 QF-PCR 엔드포인트 검사를 통해 검출합니다.
렌티바이러스 검출 검사(복제 가능 바이러스): 생산 과정에서 복제 가능 렌티바이러스(RCL)가 생성될 수 있습니다. 이 검사는 감수성 인간 T 세포주에서 RCL을 증폭한 후 ELISA 및 PBRT를 통해 엔드포인트 검사를 수행합니다.
레트로바이러스 검출 검사(복제 가능 레트로바이러스 벡터): 레트로바이러스는 유전자 치료에서 바이러스 벡터로 일반적으로 사용됩니다. 이 검사는 FDA 지침을 준수하여 전체 벡터 수확물의 5%에서 최소 하나의 감염 단위를 검출하도록 설계되었습니다.
아데노부속 바이러스 감염 역가 측정: HeLa RC32 세포에서 QF-PCR 엔드포인트를 사용하여 아데노부속 바이러스 벡터의 감염 역가를 측정합니다.
디지털 드롭릿 PCR(ddPCR)을 통한 바이러스 벡터 유전체 역가 정량화: ddPCR은 표준 곡선이나 높은 증폭 효율 없이도 높은 정확도를 제공합니다.
종 특이적 바이러스 PCR 검사

RNA 및 DNA 바이러스의 검출 및 정량화를 위한 표준 QF-PCR 및 ddPCR 기반 방법을 제공합니다.
아데노바이러스, 헤르페스바이러스, 파필로마바이러스 및 폴리오마바이러스에 대한 광범위한 PCR 검사를 제공합니다.
PCR 기반 역전사 효소(PBRT) 검사를 사용하여 감염성 레트로바이러스를 검출합니다.
바이러스 안전성 검사 프로젝트를 시작하는 데 도움이 필요하시면, 당사의 전문가들이 지원해 드리겠습니다.

Viral Safety Testing

The biosafety package for any biopharmaceutical product must include a comprehensive plan for the detection of endogenous and adventitious agents. Have a viral safety testing question? Connect with one of our scientists to learn how we can help.

Viral Safety Evaluation of Biotechnology Products

Charles River offers a portfolio of in vivo, in vitro, and biochemical viral safety assays. Assays can be chosen and customized to address your specific concerns and needs, ensuring that an appropriate testing plan is designed for your product. Fast Track Testing is also available for quick delivery of urgently needed results.

In Vivo Assays

Our GMP-compliant in vivo biosafety testingservices are conducted at sites in both Ireland and the US (Shrewsbury, MA and Wilmington, MA) and use testing protocols specifically designed to meet all pertinent regulatory requirements.

• Mouse, hamster, and rat antibody production (MAP, HAP, RAP) testing
• Adventitious virus assays, including specific assays for the testing of vaccines
• 84-day and 120-day tumorigenicity tests in athymic nude mice

Cell-Based In Vitro Adventitious Agent Testing Assays

Please contact us to address your specific contamination risks and discuss how we may develop appropriate customized assays.

• Retrovirus detection assays

  Our assays are designed to detect certain helper-type viruses including amphotropic and xenotropic murine leukemia viruses. Samples may first be amplified in susceptible cells and are detected with an S+L- focus assay.

• 14- and 28-day adventitious agent assays

  Our 14- and 28-day adventitious agent assays allow for the detection of low-level viral contaminants in biologics. We have a wide range of cell line and virus combinations available for use based on the nature of your sample.

• Porcine and bovine adventitious agent assays

  Our porcine and bovine adventitious agent assays follow for 9 CFR compliant detection of viral agents in fetal bovine serum, porcine trypsin, porcine pepsin, cell-free supernatants, cell lysates, and other bovine and porcine products.

• XC plaque assay

  Our assays for extended and direct XC plaque assays allow for the quantification of ecotropic murine leukemia viruses.

• S+L- focus assay

  S+L- assays are available for either direct detection or as an endpoint for other assays to allow for the detection of retroviruses.

• Electron Microscopy

  EM analysis is performed by our Pathology Associated division and is GLP compliant. We offer both transmission and scanning electron microscopy. Ultrastructural morphology procedures allow for the visualization of unique structural details and quantification of cell organelles and subcellular structures. Additionally, we offer high throughput quantification of empty and full capsids in viral vectors and viral particle quantification. Review additional information about our TEM services.

• Co-cultivation assays (murine, ecotropic, amphotropic, and rodent)

  Our assays co-cultivate test cells with susceptible substrate cells for the isolation and amplification of potential infectious retrovirus that would otherwise not be detected by direct infectivity studies. A variety of endpoint assays, including PBRT, immunofluorescent staining, and S+L- focus assays, are available for detection.

A Nimble Platform for Replication-Competent Virus Testing
In this webinar, we discuss the development of platform assays that test for the presence of replication-competent viruses in the most common gene therapy vectors while maintaining product integrity.
Watch webinar

Gene Therapy Vector Assays

• Adenovirus detection assay (Replication-competent virus)

  Replication-Competent Adenovirus (RCA) may be generated in viral vectors as part of the production process. Our assay relies on amplification of potential RCAs in a susceptible, non-complementing cell line, followed by observation of adenoviral-associated cytopathic effect.

• Adeno-associated virus detection assay (Replication-competent virus)

  Replication-competent adeno-associated viruses may be generated in viral vectors as part of the production process. Our assay relies on amplification of potential rcAAVs in a susceptible cell line co-infected with a helper virus. rcAAV is detected with a QF-PCR endpoint assay.

• Lentivirus detection assay (Replication-competent virus)

  Replication-competent lentiviruses may be generated in viral vectors as part of the production process. Our assay relies on amplification of potential RCLs in a susceptible human T cell line. Amplified samples are subsequently added to fresh cells for detection. Endpoint testing is performed via ELISA and PBRT.

• Retrovirus detection assay (Replication-competent retroviral vector)

  Retroviruses are commonly used as viral vectors in gene therapy. Designed to be replication incompetent, there is still some risk for the manufacturing process to trigger a recombinant event. For this reason, retrovirus-based products are required to be tested at multiple stages of the manufacturing process. Our RCR assay meets FDA guidelines to detect at least one infectious unit in 5% of the total vector harvest and in a matrix of up to 100 million producer cells or transduced cells.

• Adeno-associated virus infectious titers by TCID50 assay with QF-PCR endpoint

  Infectious titers of adeno-associated viral vectors are performed on HeLa RC32 cells with a gene of interest specific QF-PCR endpoint. Infectious titers of adeno-associated viruses can also be determined on susceptible cells with a QF-PCR endpoint.

• Quantification of viral vector genomic titers by ddPCR

  Droplet Digital PCR is a technique that provides a higher degree of precision compared to QF-PCR, without the need for a standard curve or for a high degree of amplification efficiency. We have assays available to perform genomic titers of adeno-associated viruses and adeno-associated viral vectors. We also have experience creating assays for other viral vector targets.

Species-Specific Viral PCR Assays

• Standard QF-PCR and ddPCR based methods for detection and quantification of RNA and DNA viruses Method development available for customized assays.
• Rapid, sensitive, and specific broad-range PCR assays for adenoviruses, herpesviruses, papillomaviruses, and polyomaviruses.
• Detection of infectious retroviruses using PCR-based reverse transcriptase (PBRT) assay.

Need help kicking off your viral safety testing project? Our specialists are here to support you.
Request a consult

Adventitious Agent Testing For MMV: How Much Do We Really Know?
Experts discuss the current state of viral safety testing and the emergence of broad molecular methods, such as Next-Generation Sequencing (NGS), that address some of the gaps in traditional viral safety testing of biologics.
Watch the webinar

Frequently Asked Questions (FAQs) About Adventitious Agents

• What are adventitious agents?

  Adventitious agents are defined by the World Health Organization (WHO) as microorganisms that may have been unintentionally introduced into the manufacturing process of a biological medicinal product.

• Why is adventitious agent testing important?

  For any vaccine, medicine, or therapy produced using biological materials, there is the possibility that those materials may be contaminated with adventitious agents. If those adventitious agents are given to animals or humans, there is the risk that they could cause serious disease. In order to ensure the safety of biologics, regulatory agencies around the world have developed guidelines for adventitious agent testing to screen products for the presence of such adventitious agents.