Invitrogen™

CloneMiner™ II cDNA Library Construction Kit

CloneMiner™ II cDNA Library Construction Kit는 2세대 CloneMiner™ kit로 제한효소 클로닝 없이 대표성 높은 cDNA 라이브러리를 빠르게 수립할 수 있게자세히 알아보기

CloneMiner™ II cDNA Library Construction Kit는 2세대 CloneMiner™ kit로 제한효소 클로닝 없이 대표성 높은 cDNA 라이브러리를 빠르게 수립할 수 있게 합니다. 이 혁신적인 라이브러리 수립 기술은 SuperScript™ III Reverse Transcriptase와 Gateway™ cloning 기술을 통합해 이전에 얻을 수 없었던 전체 길이 클론을 발견할 수 있게 합니다. 이 kit를 사용하면 시간이 오래 걸리고 비효율적인 ligation 반응을 피할 수 있어 신속하게 대표성 높은 라이브러리를 만들 수 있습니다.

CloneMiner™ II cDNA Library Construction Kit는 다음을 보장합니다.
• 높은 일차 역가
• 넓은 평균 insert 크기
• 전체 길이 유전자 비율 최대
• 제한효소 digestion과 ligation 없이 여러 destination vector에 cDNA를 매우 효율적으로 클로닝

CloneMiner™ II Kit 작업 방법:

• 전체 길이 cDNA의 높은 수율: CloneMiner™ II kit에는 SuperScript™ III가 들어있어 cDNA 수율이 높습니다. 본사 고유 SuperScript™ II RT 돌연변이인 SuperScript™ III Reverse Transcriptase (RT)는 50°C에서 활성이며 반감기가 220분입니다. 또한 RNase H 활성을 낮추어 첫 strand 합성 중 RNA 변성을 줄이고 전체 길이 유전자 비율을 높이는 점돌연변이도 있습니다.

• Gateway™ cloning 기술로 제한효소 클로닝이 필요하지 않습니다. 클로닝에서 제한효소와 연결효소를 사용하지 않는 영역 특정 재조합 시스템인 Gateway™ 기술로 라이브러리를 수립합니다. 각 cDNA insert를 Gateway™ donor vector에 있는 complementary att 영역과 재조합하는 특정 att 재조합 영역에 삽입하여(cDNA 합성 단계 중 추가) entry clone을 생성합니다. 그 후 Entry clone이 Gateway™ expression vector와 재조합하여 expression clone을 생성하기 때문에 제한효소와 연결효소 사용을 효율적으로 대체합니다. 이렇게 얻은 clone은 원래 방향과 해독 프레임을 유지하여 전체 길이 유전자와 전체 라이브러리 기능 분석이 가능합니다.

이 Kit와 원래 CloneMiner™ Kit와 다른 점?
• 새로운 이 kit는 단순화된 프로토콜을 가지고 있습니다.
• 높은 cDNA 수율을 보장하기 위해 SuperScript™ II Reverse Transcriptase (RT)를 SuperScript™ III Reverse Transcriptase으로 대체했습니다.
• 피펫 과정을 줄이며 반응 준비를 하기 위해 Gateway™ BP Clonase™ Enzyme Mix를 단일 mix에 효소와 버퍼를 포함한 Gateway™ BP Clonase™ II Enzyme Mix로 대체 하였습니다.

사양

제품 유형Library Preparation Kit

박테리아 또는 효모 균주DH10B

클로닝 방법Gateway

최종 제품 유형cDNA Library

역전사 효소SuperScript™ III

벡터pDONR222

형식Kit

제품라인CloneMiner™

용도(애플리케이션)cDNA Libraries & Library Construction

수량1 Kit

Unit SizeEach