Takara Photoconvertible fluorescent proteins

Takara Living Colors Dendra2 Photoconvertible Fluorescent Protein

제품 개요

Living Colors Dendra2는 녹색에서 적색으로 전환 가능한 단일체 형광단백질로, 산호류 Dendronephthya sp. 에서 유래되었습니다.
Dendra2는 성숙 효율과 광변환 전후의 밝은 형광을 위해 최적화되어 있으며, 포유류 세포에서 높은 발현을 위해 코돈 사용이 조정되었습니다. 다양한 생물 시스템에서도 발현 가능합니다.

Dendra2는 20°C와 37°C 모두에서 효율적으로 성숙하므로, 포유류 세포부터 냉혈동물까지 폭넓은 실험 시스템에 적용할 수 있습니다.
포유류 세포에 일시적으로 형질감염 시 10–12시간 내 균일한 녹색 신호를 나타내며, 세포 독성이 없습니다.

시각화 방법

1. 녹색(변환 전) Dendra2 시각화

• 여기 및 방출 최대값: 490 nm / 507 nm
• FITC 또는 유사 필터 세트를 사용하여 관찰 가능
• 주의: 460–500 nm의 강한 청색광은 Dendra2의 광변환을 유도하므로, 낮은 강도의 빛으로 녹색 신호를 관찰해야 합니다.

2. 녹색에서 적색으로 변환

• 변환 가능한 파장 범위: UV (360–420 nm) 또는 청색 (460–500 nm)
• 권장 광원: 488 nm Ar 레이저 또는 405 nm 다이오드 레이저
  (405 nm UV광은 효율적이나 세포 손상을 유발할 수 있음)

3. 적색(변환 후) Dendra2 시각화

• 여기 및 방출 최대값: 553 nm / 573 nm
• TRITC 또는 유사 필터 세트를 사용하여 관찰 가능
• 적색으로 변환된 Dendra2는 비가역적이며 매우 높은 광안정성을 보여 장기 단백질 추적에 적합합니다.

융합 단백질 응용

Dendra2는 단일체 형광단백질로, 다양한 단백질과 성공적으로 융합되었습니다.
예시:

• 베타-액틴 (β-actin)
• BH3 상호작용 도메인 사멸 촉진제 (BID)
• 핵소체 단백질 피브릴라린 (fibrillarin)
• 비멘틴 (vimentin)
• 알파-튜불린 (α-tubulin)

고대비 시각화 성능

광변환이 완료되면:

• 적색 형광: 150–300배 증가
• 녹색 형광: 10–15배 감소
• 결과적으로 약 4,000배의 형광 대비 향상
  이로 인해 활성화된 단백질의 이동과 비활성화된 형태의 교체를 동시에 추적할 수 있습니다.

참고 자료

Dendra2 서열 파일은 제품 페이지의 Documents 탭에서 확인할 수 있습니다.