Thermo Fisher Scientific CD45RA Monoclonal Antibody (HI100), Super Bright 645, eBioscience

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Applications

Tested Dilution

Publications

Flow Cytometry (Flow)

5 µL (0.125 µg)/test

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Product Specifications

Published species

Not Applicable

Host/Isotype

Mouse / IgG2b, kappa

Mouse IgG2b kappa Isotype Control (eBMG2b), Super Bright™ 645, eBioscience™

Class

Monoclonal

Type

Antibody

Clone

HI100

Conjugate

Super Bright™ 645 Super Bright™ 645 Super Bright™ 645

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Excitation/Emission Max

414/645 nm View spectra spectra

Form

Liquid

Concentration

5 µL/Test

Storage conditions

4° C, store in dark, DO NOT FREEZE!

Shipping conditions

Wet ice

RRID

AB_2662461

Product Specific Information

Description: The HI100 monoclonal antibody reacts with human CD45RA, a 220 kDa molecule expressed by subpopulations of CD4+ peripheral T lymphocytes, CD8+ peripheral T lymphocytes, and B cells. The CD45RA+ T cell populations are mainly naive/virgin allowing the use

of HI100 mAb as a phenotypic marker to discriminate T cell subsets.

Applications Reported: This HI100 antibody has been reported for use in flow cytometric analysis.

Applications Tested: This HI100 antibody has been pre-diluted and tested by flow cytometric analysis of normal human peripheral blood cells. This may be used at 5 µL (0.125 µg) per test. A test is defined as the amount (µg) of antibody that will stain a cell sample in a final volume of 100 µL. Cell number should be determined empirically but can range from 10^5 to 10^8 cells/test.

Super Bright 645 is a tandem dye that can be excited with the violet laser line (405 nm) and emits at 645 nm. We recommend using a 660/20 bandpass filter. Please make sure that your instrument is capable of detecting this fluorochrome.

When using two or more Super Bright dye-conjugated antibodies in a staining panel, it is recommended to use Super Bright Complete Staining Buffer (Product # SB-4401) to minimize any non-specific polymer interactions. Please refer to the datasheet for Super Bright Staining Buffer for more information.

Light sensitivity: This tandem dye is sensitive to photo-induced oxidation. Please protect this vial and stained samples from light.

Fixation: Samples can be stored in IC Fixation Buffer (Product # 00-8222) (100 µL of cell sample + 100 µL of IC Fixation Buffer) or 1-step Fix/Lyse Solution (Product # 00-5333) for up to 3 days in the dark at 4°C with minimal impact on brightness and FRET efficiency/compensation. Some generalizations regarding fluorophore performance after fixation can be made, but clone specific performance should be determined empirically.

Excitation: 405 nm; Emission: 645 nm; Laser: Violet Laser

Super Bright Polymer Dyes are sold under license from Becton, Dickinson and Company.

Target Information

CD45RA is an isoform of the CD45 complex and has restricted expression between different subtypes of lymphoid cells. CD45 (LCA, leukocyte common antigen) is a receptor-type protein tyrosine phosphatase ubiquitously expressed in all nucleated hematopoietic cells, comprising approximately 10% of all surface proteins in lymphocytes. CD45 glycoprotein is crucial in lymphocyte development and antigen signaling, serving as an important regulator of Src-family kinases. CD45 protein exists as multiple isoforms as a result of alternative splicing and these isoforms differ in their extracellular domains, however, they share identical transmembrane and cytoplasmic domains. CD45 isoforms differ in their ability to translocate into the glycosphingolipid-enriched membrane domains and their expression depends on cell type and physiological state of the cell. Besides the role in immunoreceptor signaling, CD45 is important in promoting cell survival by modulating integrin-mediated signal transduction pathway and is also involved in DNA fragmentation during apoptosis. CD45 is expressed on cells of the human hematopoietic lineage, with the exception of mature red cells and is not detected on differentiated cells of other tissues. It is likely that CD45 plays an important role in signal transduction, inhibition or upregulation of various immunological functions. Diseases associated with CD45 dysfunction include severe combined immunodeficiency and Hepatitis C.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. Not for resale without express authorization.


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