
Norgen ProteoSpin Inclusion Body Isolation Micro Kit
포함체 단백질을 빠르고 효율적으로 분리·정제할 수 있는 올인원 키트. 스핀 칼럼 기반으로 간편한 프로토콜 제공. 세포 용해, 포함체 용해 및 정제 시약 포함. 최대 12샘플을 60분 내 처리 가능하며, SDS-PAGE 및 Western blot 등 다양한 분석에 적합.
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Norgen ProteoSpin Inclusion Body Isolation Micro Kit
제품 개요
ProteoSpin™ Inclusion Body Protein Isolation Kits는 유도된 박테리아 배양액으로부터 포함체 단백질을 빠르고 효율적으로 분리·정제하기 위한 올인원 솔루션입니다. 세포 용해, 포함체 용해 및 정제 과정을 간소화하여 시간과 비용을 절감합니다.
주요 특징 및 장점
- 포함체 단백질 분리 및 정제를 위한 올인원 솔루션
- 빠르고 간편한 스핀 칼럼 기반 프로토콜
- 세포 용해제, 포함체 용해제, 완충액, 스핀 칼럼 포함
- Norgen의 레진 분리 매트릭스를 이용한 효율적 정제
제품 설명
이 키트는 유도된 박테리아 배양액으로부터 포함체 단백질을 분리·정제하는 데 필요한 모든 시약을 제공합니다.
- 독자적인 세포 용해제를 사용해 세포를 선택적으로 용해하고 포함체를 고형 형태로 분리합니다.
- 포함체 용해 시약으로 포함체를 용해하여 단백질을 방출합니다.
- 스핀 칼럼을 이용해 단백질을 빠르고 간편하게 정제, 버퍼 교환 및 탈염할 수 있습니다.
이 키트는 대량 발현 전 리컴비넌트 단백질의 스크리닝에 매우 유용합니다.
ProteoSpin™ Inclusion Body Protein Isolation Micro Kit
- 최대 12개의 샘플을 약 60분 내 처리 가능
- 각 스핀 칼럼에서 최대 50 µg의 단백질 회수 가능
- 정제된 단백질은 SDS-PAGE, 2D 젤, Western blot, 질량분석 등 다양한 분석에 적합
ProteoSpin™ Inclusion Body Protein Isolation Maxi Kit
- 최대 4개의 샘플을 약 2시간 내 처리 가능
- 각 스핀 칼럼에서 최대 12 mg의 단백질 회수 가능
- 정제된 단백질은 다양한 단백질 분석에 바로 사용 가능
포함체(Inclusion Body)에 대하여
박테리아는 다양한 단백질 발현에 널리 사용되지만, 약 70~80%의 단백질은 불용성 포함체 형태로 존재합니다.
이 단백질은 잘못된 접힘으로 인해 비활성 상태일 수 있지만, 불용성 단백질은 단백질분해효소에 대한 내성이 높아 생산성이 높습니다.
포함체 단백질 정제는 일반적으로 복잡하고 시간이 많이 걸리지만, 본 키트는 세포 파쇄, 포함체 용해 및 스핀 칼럼 정제를 통합하여 효율적인 정제를 제공합니다.
Supporting Data
Figure 1. Isolation of Acidic Recombinant Protein.
BL21(DE3) pLysS 세포에서 발현된 50 kDa 산성 키메라 단백질을 Micro Kit로 정제. 세포 용해, 포함체 분리 및 용해 후 단백질을 칼럼에 결합·세척·용출. 12.5% 폴리아크릴아미드 젤에서 전기영동 후 Coomassie Blue R-250로 염색.
Figure 2. Isolation of Basic Recombinant Protein (RNase A).
BL21(DE3) pLysS 세포에서 발현된 RNase A(염기성 단백질)를 Micro Kit로 정제. 동일한 절차로 처리 후 SDS-PAGE 분석, Coomassie Blue R-250 염색.
Figure 3. Efficient Isolation of Inclusion Body Proteins.
유전자 발현 후 포함체를 추출·용해·정제. 12% SDS-PAGE 분석 결과, 다양한 분자량의 단백질이 효율적으로 정제됨을 확인.
| 분자량 (kDa) | 20 | 25 | 30 | 35 | 40 | 50 | 60 | 70 | 80 |
|---|
Figure 4. No Loss of Proteins when Isolating a Basic Protein.
100 mL 배양액에서 발현된 30 kDa 염기성 단백질을 Maxi Kit로 정제. 각 단계별 시료를 SDS-PAGE로 분석. 단백질 손실 없이 효율적 결합 및 용출 확인.
| Lane | Label |
|---|---|
| 1 | Input |
| 2 | Flowthrough |
| 3 | Wash |
| 4 | Elution 1 |
| 5 | Elution 2 |
Figure 5. No Loss of Proteins when Isolating an Acidic Protein.
100 mL 배양액에서 발현된 70 kDa 산성 단백질을 Maxi Kit로 정제. 각 단계별 시료를 SDS-PAGE로 분석. 단백질 손실 없이 효율적 결합 및 용출 확인.
| Lane | Label |
|---|---|
| 1 | Input |
| 2 | Flowthrough |
| 3 | Wash |
| 4 | Elution 1 |
| 5 | Elution 2 |
Kit Specifications
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| Maximum Culture Volume | 1.5 mL |
| Yield from 1.5 mL | Up to 50 μg |
| Minimum Elution Volume | 30 μL |
| Time to Process 12 Samples | 60 minutes |
Storage Conditions
- Cell Lysis Reagent 및 IB Solubilization Reagent는 4°C 보관
- 기타 용액은 실온에서 밀봉 보관
- 출하일로부터 2년간 안정
- 개봉 후에는 4°C 보관(단, pH Binding Buffers 제외)
- 4°C에서 침전 발생 시, 실온에서 가볍게 가열하여 용해
Kit Components
| Component | Cat. 10300 (Micro - 25 preps) | Cat. 17700 (Maxi - 4 preps) |
|---|---|---|
| Wash Solution C | 30 mL | 130 mL |
| Wash Solution N | 30 mL | 130 mL |
| Binding Buffer A | 4 mL | 20 mL |
| Binding Buffer N | 4 mL | 20 mL |
| Elution Buffer C | 8 mL | 2 × 30 mL |
| Protein Neutralizer | 4 mL | 4 mL |
| Cell Lysis Reagent | 15 mL | 110 mL |
| IB Solubilization Reagent | 2 mL | 50 mL |
| Syringes, 1cc | 25 | - |
| Needles (20G × 1") | 25 | - |
| Syringes, 10 mL | - | 4 |
| Needles (18G × 1.5") | - | 4 |
| Micro Spin Columns | 25 | - |
| Maxi Spin Columns (SiC) | - | 4 |
| Collection Tubes | 25 | - |
| Elution Tubes (1.7 mL) | 25 | - |
| Elution Tubes (50 mL) | - | 4 |
| Product Insert | 1 | 1 |
Documentation
Protocols
Application Notes
- Screening For Bacterial Clones Expressing Inclusion Body Proteins
- A Time Course Induction Study of Recombinant Protein Expression In E. coli
Safety Data Sheets
Citations
| Title | Journal | Authors |
|---|---|---|
| CP40 from Corynebacterium pseudotuberculosis is an endo-β-N-acetylglucosaminidase | BMC Microbiology, 2016 | Shadnezhad A, Naegeli A, Collin M |
| Proteome of Human Calcium Kidney Stones | Urology, 2010 | Canales BK, Anderson L, Higgins L, Ensrud-Bowlin K, Roberts KP, Wu B, Kim IW, Monga M |
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