Norgen AAV Quantification Kit

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AAV 역전말단반복(ITR) 서열을 TaqMan qPCR 방식으로 정량 검출하는 키트. 비플라스미드 표준으로 정확한 벡터 정량화 가능. 2시간 내 신속한 추출 및 정량. 다양한 AAV 혈청형에 적용 가능. 연구용으로만 사용.

브랜드: Norgen
카테고리: DNA kits
판매단위: pk

#Norgen #PCR Reagents #Electrophoresis

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Norgen · Norgen AAV Quantification Kit

Norgen AAV Quantification Kit

SKU: 63800
공급업체: Norgen

AAV Quantification Kit은 TaqMan® 기술을 기반으로 한 실시간 PCR에서 아데노-연관 바이러스(AAV)의 역전말단반복(ITR) 서열을 검출하도록 설계되었습니다. Norgen의 독자적인 실리콘 카바이드 기술로 정제된 AAV2 ITR 표준을 사용하여 신뢰성 높은 표준 곡선을 생성할 수 있습니다. 플라스미드 기반 표준을 사용하지 않으므로 ITR 서열의 불완전한 해리나 재조합으로 인한 정량 오류를 방지합니다. 또한, 간단하고 빠른 바이러스 DNA 추출 과정을 통해 비캡시드(non-encapsidated) DNA를 제거하면서 AAV DNA를 효율적으로 회수할 수 있습니다. 본 키트는 진단용이 아닌 연구용으로만 사용됩니다.

Features and Benefits

2시간 이내 신속한 AAV DNA 추출 및 정량
AAV2 ITR을 타깃하는 범용 qPCR 분석으로 대부분의 AAV 벡터 정량 가능
정제된 DNA 표준으로 실험실 간 데이터 비교 용이
비플라스미드 표준 사용으로 정량 오류 방지
DNase 처리로 비바이러스성 DNA 제거
최소한의 샘플 조작으로 최대 DNA 회수율 확보

Supporting Data

Figure 1. AAV 표준의 10배 희석 단계별 증폭 곡선

Amplification Curve (증폭 곡선)

세로축: RFU (상대 형광 단위)
가로축: Cycles (사이클 수)

희석 단계	값
1	10⁻²
2	10⁻³
3	10⁻⁴
4	10⁻⁵
5	10⁻⁶
6	10⁻⁸
7	NTC

각 희석 단계별로 RFU가 사이클 수에 따라 증가하는 증폭 패턴을 보여줍니다.

Figure 2. AAV 표준 희석 시리즈의 Ct vs Copy Number 관계

qPCR Assay With AAV Standard Dilution Series

R² = 0.999
세로축: Ct
가로축: Copy number

희석 단계	Copy number (상대 로그 값)
1E-08	1.E+00
1E-07	1.E+02
1E-06	1.E+04
1E-05	1.E+06
1E-04	1.E+08
1E-03	1.E+10
1E-02	—

AAV 표준 희석 시리즈에서 Ct와 copy number 간의 높은 선형성(R²=0.999)을 확인할 수 있습니다.

Figure 3. 입력 부피별 qPCR 복제 수 및 세포 전이 결과

A. qPCR Copy Number

입력 부피	qPCR Copy #
1 mL	약 2.0E+08
3 mL	약 6.0E+08
9 mL	약 1.3E+09

B. HTX 세포 전이 이미지

샘플	설명
1 mL	현미경 이미지
3 mL	현미경 이미지
9 mL	현미경 이미지

Storage Conditions and Product Stability

모든 구성품은 수령 즉시 -20°C에 보관
Master Mix 및 Positive Control의 반복 동결·해동(2회 초과) 금지
간헐적 사용 시 소분 보관 권장
-20°C에서 1년간 성능 유지

Kit Components

Component	Cat. 63800 (24 rxns)
Enzyme Incubation Buffer A	500 µL
DNase I	25 µL
DNase Stop Solution	100 µL
2X PCR Mastermix	350 µL
AAV Primer & Probe Mix	90 µL
AAV Standard	6 µL
Nuclease-Free Water (Negative Control)	1.25 mL
Product Insert	1

Documentation

Protocols

AAV Quantification Kit - Protocol (24 rxns)

Safety Data Sheets

AAV Quantification Kit - SDS

FAQs

Q1. 어떤 AAV 혈청형과 함께 사용할 수 있나요?
AAV2 ITR을 타깃하는 범용 qPCR 분석으로 AAV1, 3, 6, 7 혈청형과 교차 반응성을 가집니다.

Q2. 검출 가능한 AAV 게놈 복제 수 범위는?
약 2 × 10³ ~ 2 × 10¹⁰ genome copies를 검출할 수 있습니다.

Q3. 사용되는 AAV 표준의 특성은?
AAV2 ITR을 포함하는 62 bp의 비플라스미드 표준을 사용하여 플라스미드 기반 표준의 한계를 극복합니다.

Citations

항목	내용
Title	Identification of adeno-associated virus variants for gene transfer into human neural cell types by parallel capsid screening
Journal	Scientific Reports, 2022
Authors	Lea Jessica Flitsch et al.

제품 이미지

Figure 1. Amplification of ten fold serial dilutions of purified Norgen AAV Standard: 10⁻² to 10⁻⁸ dilutions and no target control (NTC).
Figure 2. XY Scatter Plot of Ct versus log copy number demonstrates high linearity for AAV standard dilution series.
Figure 3. Determination of copy number using Norgen’s AAV Quantification Kit and transduction of HTX cells.