Norgen AAV Quantification Kit

Norgen AAV Quantification Kit

SKU: 63800
공급업체: Norgen

AAV Quantification Kit은 TaqMan® 기술을 기반으로 한 실시간 PCR에서 아데노-연관 바이러스(AAV)의 역전말단반복(ITR) 서열을 검출하도록 설계되었습니다. Norgen의 독자적인 실리콘 카바이드 기술로 정제된 AAV2 ITR 표준을 사용하여 신뢰성 높은 표준 곡선을 생성할 수 있습니다. 플라스미드 기반 표준을 사용하지 않으므로 ITR 서열의 불완전한 해리나 재조합으로 인한 정량 오류를 방지합니다. 또한, 간단하고 빠른 바이러스 DNA 추출 과정을 통해 비캡시드(non-encapsidated) DNA를 제거하면서 AAV DNA를 효율적으로 회수할 수 있습니다. 본 키트는 진단용이 아닌 연구용으로만 사용됩니다.

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Features and Benefits

• 2시간 이내 신속한 AAV DNA 추출 및 정량
• AAV2 ITR을 타깃하는 범용 qPCR 분석으로 대부분의 AAV 벡터 정량 가능
• 정제된 DNA 표준으로 실험실 간 데이터 비교 용이
• 비플라스미드 표준 사용으로 정량 오류 방지
• DNase 처리로 비바이러스성 DNA 제거
• 최소한의 샘플 조작으로 최대 DNA 회수율 확보

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Supporting Data

Figure 1. AAV 표준의 10배 희석 단계별 증폭 곡선

Amplification Curve (증폭 곡선)

• 세로축: RFU (상대 형광 단위)
• 가로축: Cycles (사이클 수)

희석 단계	값
1	10⁻²
2	10⁻³
3	10⁻⁴
4	10⁻⁵
5	10⁻⁶
6	10⁻⁸
7	NTC

각 희석 단계별로 RFU가 사이클 수에 따라 증가하는 증폭 패턴을 보여줍니다.

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Figure 2. AAV 표준 희석 시리즈의 Ct vs Copy Number 관계

qPCR Assay With AAV Standard Dilution Series

• R² = 0.999
• 세로축: Ct
• 가로축: Copy number

희석 단계	Copy number (상대 로그 값)
1E-08	1.E+00
1E-07	1.E+02
1E-06	1.E+04
1E-05	1.E+06
1E-04	1.E+08
1E-03	1.E+10
1E-02	—

AAV 표준 희석 시리즈에서 Ct와 copy number 간의 높은 선형성(R²=0.999)을 확인할 수 있습니다.

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Figure 3. 입력 부피별 qPCR 복제 수 및 세포 전이 결과

A. qPCR Copy Number

입력 부피	qPCR Copy #
1 mL	약 2.0E+08
3 mL	약 6.0E+08
9 mL	약 1.3E+09

B. HTX 세포 전이 이미지

샘플	설명
1 mL	현미경 이미지
3 mL	현미경 이미지
9 mL	현미경 이미지

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Storage Conditions and Product Stability

• 모든 구성품은 수령 즉시 -20°C에 보관
• Master Mix 및 Positive Control의 반복 동결·해동(2회 초과) 금지
• 간헐적 사용 시 소분 보관 권장
• -20°C에서 1년간 성능 유지

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Kit Components

Component	Cat. 63800 (24 rxns)
Enzyme Incubation Buffer A	500 µL
DNase I	25 µL
DNase Stop Solution	100 µL
2X PCR Mastermix	350 µL
AAV Primer & Probe Mix	90 µL
AAV Standard	6 µL
Nuclease-Free Water (Negative Control)	1.25 mL
Product Insert	1

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Documentation

Protocols

• AAV Quantification Kit - Protocol (24 rxns)

Safety Data Sheets

• AAV Quantification Kit - SDS

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FAQs

Q1. 어떤 AAV 혈청형과 함께 사용할 수 있나요?
AAV2 ITR을 타깃하는 범용 qPCR 분석으로 AAV1, 3, 6, 7 혈청형과 교차 반응성을 가집니다.

Q2. 검출 가능한 AAV 게놈 복제 수 범위는?
약 2 × 10³ ~ 2 × 10¹⁰ genome copies를 검출할 수 있습니다.

Q3. 사용되는 AAV 표준의 특성은?
AAV2 ITR을 포함하는 62 bp의 비플라스미드 표준을 사용하여 플라스미드 기반 표준의 한계를 극복합니다.

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Citations

항목	내용
Title	Identification of adeno-associated virus variants for gene transfer into human neural cell types by parallel capsid screening
Journal	Scientific Reports, 2022
Authors	Lea Jessica Flitsch et al.

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제품 이미지