
Norgen AAV Purification Kit
AAV 벡터를 세포 용해물 또는 배양액에서 고농도로 정제하는 키트. 최대 90% 회수율, 특수 장비 불필요. 다양한 AAV 혈청형에 적용 가능. in vivo 및 in vitro 실험에 적합한 고활성 벡터 제공.
- 카탈로그번호
- 66100
- 브랜드
- Norgen
- 카테고리
- Viral Reagents
- 판매단위
- pk
카탈로그
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Norgen AAV Purification Kit
SKU: 66100
AAV 벡터를 세포 용해물 또는 배양액에서 농축 및 정제하기 위한 키트입니다.
특징 및 장점
- 세포 또는 배양액 등 다양한 입력 시료에서 AAV 정제 가능
- 최대 90%의 높은 회수율
- 특수 장비 불필요
- 다양한 AAV 혈청형(AAV6, AAV9 등)에 적용 가능
- In vivo 및 In vitro 실험에 적합한 고활성 AAV 벡터 제공
- Norgen의 레진 기반 스핀 컬럼 크로마토그래피 방식 사용
제품 설명
Norgen의 AAV Purification Kits는 빠르고 간단한 절차로 세포 용해물 및 배양액으로부터 AAV 벡터를 농축 및 정제할 수 있습니다. 정제 과정은 Norgen Biotek의 독자적인 레진에 AAV를 침전시키는 방식으로 진행됩니다. 세포 잔여물은 원심분리 단계에서 제거되며, DNA 및 RNA 오염물은 효소 처리로 감소됩니다. 정제된 AAV 벡터는 in vitro 및 in vivo 전달 실험에 매우 적합합니다.
키트 종류 및 용량
AAV Purification Kit
- 15회 준비 가능 (총 500 mL의 배양액 입력)
- 1 mL 세포 펠릿 정제 가능 (최대 15 mL까지)
- 최대 33배 시료 농축
AAV Purification Mini Kit
- 0.5–8 mL 시료 입력 가능
- 최대 50배 농축
- 200 µL로 용출
- 4개 샘플 처리 시 약 1.5시간 소요 (핸즈온 45분)
AAV Purification Midi Kit
- 8–45 mL 입력 가능
- 최대 50배 농축
- 1 mL로 용출
- 4개 샘플 처리 시 약 2–2.5시간 소요 (핸즈온 1.5시간)
AAV Purification Maxi Kit (Slurry Format)
- 45–90 mL 입력 가능
- 최대 200배 농축
- 1–10 mL로 용출
- 900 mL 샘플 처리 시 약 2.5–3.5시간 소요 (농축 단계 추가 시 30분 추가)
스펙 요약
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| Resin Binding Capacity | ≥ 5 × 10¹⁰ AAV particles (qPCR 기준) |
| AAV Serotype | AAV6, AAV9 및 기타 |
| 입력 시료 | 세포, 배양액 |
| 입력 부피 (Supernatant) | 1–33.5 mL/Prep (총 500 mL) |
| 입력 부피 (Cell Pellet) | 1 mL/Prep (총 15 mL) |
| 정제 소요 시간 | 2.5–4.5시간 (핸즈온 1시간) |
| In vivo Transduction | 가능 |
저장 조건 및 안정성
- HL-SAN Nuclease: -20°C 보관
- Elution Buffer O: 4°C 보관
- 기타 용액: 실온 보관, 개봉 후 4°C
- 키트 안정성: 출하일로부터 2년
구성품
| 구성품 | Cat. 66100 (15 preps) | Cat. 63200 (20 preps) | Cat. 63300 (4–8 preps) | Cat. 63250 (1–10 preps) |
|---|---|---|---|---|
| Lysis Buffer S | 5.5 mL | 5.5 mL | 5.5 mL | 20 mL |
| DNAse I | - | 2×25 µL | 2×25 µL | 210 µL |
| RNAse A | - | 60 µL | 60 µL | 240 µL |
| HL-SAN Nuclease | 102 µL | - | - | - |
| Binding Buffer A | 20 mL | 4 mL | 4 mL | 2×8 mL |
| Purification Solution C | 60 mL | - | - | - |
| Purification Solution D | 130 mL | - | - | - |
| Wash Solution C | 2×130 mL | 60 mL | 60 mL | 3×60 mL |
| Slurry E | 12.5 mL | - | - | 2×14.5 mL |
| Elution Buffer O | 66 mL | 8.5 mL | 8.5 mL | 66 mL |
| Protein Neutralizer | 4 mL | 4 mL | 4 mL | 4 mL |
| Spin Columns | - | 20 | - | - |
| Mini Spin Columns | - | 20 | - | - |
| Midi Spin Columns (grey) | - | - | 8 | 10 |
| Midi Spin Columns (white) | - | - | 8 | - |
| Maxi Spin Columns (grey) | - | - | - | 10 |
| Maxi Spin Columns (white) | - | - | - | 10 |
| Collection Tubes | - | 40 | - | - |
| Elution Tubes (1.7 mL) | 50 | 20 | - | - |
| Midi Elution Tubes (15 mL) | - | - | 8 | 10 |
| Maxi Elution Tubes (50 mL) | - | - | - | 10 |
| Product Insert | 1 | 1 | 1 | 1 |
Supporting Data
Figure 1. In vitro transduction.
HTX 세포에 Norgen AAV Purification Kit로 정제된 벡터를 50 µL 처리한 후 결과를 관찰.
테스트된 벡터: AAV9 및 Bovine AAV (AAV-Ca).
알칼리성 포스파타제 리포터 유전자를 발현하며, 어두운 보라색 영역은 성공적인 transduction을 나타냄.
Figure 2. In vivo testing.
마우스 폐에 2×10¹¹ ss genome의 AAV9 벡터를 비강 투여 후 1개월 뒤 조직 분석.
어두운 보라색 영역은 리포터 유전자 발현 부위를 표시.
Figure 3. Transduction of HTX cells (Mini Kit).
정제된 벡터로 HTX 세포를 transduction한 결과.
텍스트: “Purified Vector / HTX Cells / Control”
Figure 4. Linear Scaling of Mini Kit.
입력량 2.5 mL, 10 mL, 15 mL에서 선형적 스케일링 확인 (R² = 0.98).
텍스트: “Copy # / 0.0E+00 ~ 6.E+09”
Figure 5. Transduction of HTX cells (Mini Kit, 다양한 입력량).
입력량: Mock, 2.5 mL, 10 mL, 15 mL.
모든 조건에서 생물학적 활성 유지 확인.
문서 자료
Protocols
- AAV Purification Kit (15 prep)
- AAV Purification Mini Kit (20 prep)
- AAV Purification Midi Kit (4–8 prep)
- AAV Purification Maxi Slurry Kit (1–10 prep)
Application Notes
- Purification of Adeno-associated Virus (AAV) Vectors Using Norgen’s AAV Purification Kit
- Purification of AAV Vectors Using Norgen’s AAV Mini and Midi Kits
Safety Data Sheets
- AAV Purification Mini Kit - SDS
- AAV Purification Midi Kit - SDS
- AAV Purification Maxi Slurry Kit - SDS
FAQ (Mini Kit 예시)
Q: AAV 시료가 컬럼을 통과하지 않습니다.
- 원심분리 속도가 낮음 → 1,500 × g 이상 확인
- 스핀 시간이 부족함 → 추가 2분 스핀
- 세포 잔여물이 컬럼을 막음 → 상층액만 사용, 필요 시 필터링
Q: AAV 회수율이 낮습니다.
- pH 조정 불량 → 3.5–3.8로 맞춤
- 초기 시료 농도 부족 → 벡터 생산 조건 최적화 필요
- Elution Buffer O 보관 불량 → 4°C에서 밀봉 보관
Q: Elution 후 펠릿이 관찰됩니다.
- 입력량 과다 가능성 → 상층액 회수 후 펠릿 재정제 권장
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