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Norgen AAV Purification Kit
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Norgen AAV Purification Kit

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AAV 벡터를 세포 용해물 또는 배양액에서 고농도로 정제하는 키트. 최대 90% 회수율, 특수 장비 불필요. 다양한 AAV 혈청형에 적용 가능. in vivo 및 in vitro 실험에 적합한 고활성 벡터 제공.

카탈로그번호
66100
브랜드
Norgen
카테고리
Viral Reagents
판매단위
pk
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Norgen · Norgen AAV Purification Kit

Norgen AAV Purification Kit

SKU: 66100

AAV 벡터를 세포 용해물 또는 배양액에서 농축 및 정제하기 위한 키트입니다.


특징 및 장점

  • 세포 또는 배양액 등 다양한 입력 시료에서 AAV 정제 가능
  • 최대 90%의 높은 회수율
  • 특수 장비 불필요
  • 다양한 AAV 혈청형(AAV6, AAV9 등)에 적용 가능
  • In vivoIn vitro 실험에 적합한 고활성 AAV 벡터 제공
  • Norgen의 레진 기반 스핀 컬럼 크로마토그래피 방식 사용

제품 설명

Norgen의 AAV Purification Kits는 빠르고 간단한 절차로 세포 용해물 및 배양액으로부터 AAV 벡터를 농축 및 정제할 수 있습니다. 정제 과정은 Norgen Biotek의 독자적인 레진에 AAV를 침전시키는 방식으로 진행됩니다. 세포 잔여물은 원심분리 단계에서 제거되며, DNA 및 RNA 오염물은 효소 처리로 감소됩니다. 정제된 AAV 벡터는 in vitroin vivo 전달 실험에 매우 적합합니다.


키트 종류 및 용량

AAV Purification Kit

  • 15회 준비 가능 (총 500 mL의 배양액 입력)
  • 1 mL 세포 펠릿 정제 가능 (최대 15 mL까지)
  • 최대 33배 시료 농축

AAV Purification Mini Kit

  • 0.5–8 mL 시료 입력 가능
  • 최대 50배 농축
  • 200 µL로 용출
  • 4개 샘플 처리 시 약 1.5시간 소요 (핸즈온 45분)

AAV Purification Midi Kit

  • 8–45 mL 입력 가능
  • 최대 50배 농축
  • 1 mL로 용출
  • 4개 샘플 처리 시 약 2–2.5시간 소요 (핸즈온 1.5시간)

AAV Purification Maxi Kit (Slurry Format)

  • 45–90 mL 입력 가능
  • 최대 200배 농축
  • 1–10 mL로 용출
  • 900 mL 샘플 처리 시 약 2.5–3.5시간 소요 (농축 단계 추가 시 30분 추가)

스펙 요약

항목 내용
Resin Binding Capacity ≥ 5 × 10¹⁰ AAV particles (qPCR 기준)
AAV Serotype AAV6, AAV9 및 기타
입력 시료 세포, 배양액
입력 부피 (Supernatant) 1–33.5 mL/Prep (총 500 mL)
입력 부피 (Cell Pellet) 1 mL/Prep (총 15 mL)
정제 소요 시간 2.5–4.5시간 (핸즈온 1시간)
In vivo Transduction 가능

저장 조건 및 안정성

  • HL-SAN Nuclease: -20°C 보관
  • Elution Buffer O: 4°C 보관
  • 기타 용액: 실온 보관, 개봉 후 4°C
  • 키트 안정성: 출하일로부터 2년

구성품

구성품 Cat. 66100 (15 preps) Cat. 63200 (20 preps) Cat. 63300 (4–8 preps) Cat. 63250 (1–10 preps)
Lysis Buffer S 5.5 mL 5.5 mL 5.5 mL 20 mL
DNAse I - 2×25 µL 2×25 µL 210 µL
RNAse A - 60 µL 60 µL 240 µL
HL-SAN Nuclease 102 µL - - -
Binding Buffer A 20 mL 4 mL 4 mL 2×8 mL
Purification Solution C 60 mL - - -
Purification Solution D 130 mL - - -
Wash Solution C 2×130 mL 60 mL 60 mL 3×60 mL
Slurry E 12.5 mL - - 2×14.5 mL
Elution Buffer O 66 mL 8.5 mL 8.5 mL 66 mL
Protein Neutralizer 4 mL 4 mL 4 mL 4 mL
Spin Columns - 20 - -
Mini Spin Columns - 20 - -
Midi Spin Columns (grey) - - 8 10
Midi Spin Columns (white) - - 8 -
Maxi Spin Columns (grey) - - - 10
Maxi Spin Columns (white) - - - 10
Collection Tubes - 40 - -
Elution Tubes (1.7 mL) 50 20 - -
Midi Elution Tubes (15 mL) - - 8 10
Maxi Elution Tubes (50 mL) - - - 10
Product Insert 1 1 1 1

Supporting Data

Figure 1. In vitro transduction.
HTX 세포에 Norgen AAV Purification Kit로 정제된 벡터를 50 µL 처리한 후 결과를 관찰.
테스트된 벡터: AAV9 및 Bovine AAV (AAV-Ca).
알칼리성 포스파타제 리포터 유전자를 발현하며, 어두운 보라색 영역은 성공적인 transduction을 나타냄.

Figure 2. In vivo testing.
마우스 폐에 2×10¹¹ ss genome의 AAV9 벡터를 비강 투여 후 1개월 뒤 조직 분석.
어두운 보라색 영역은 리포터 유전자 발현 부위를 표시.

Figure 3. Transduction of HTX cells (Mini Kit).
정제된 벡터로 HTX 세포를 transduction한 결과.
텍스트: “Purified Vector / HTX Cells / Control”

Figure 4. Linear Scaling of Mini Kit.
입력량 2.5 mL, 10 mL, 15 mL에서 선형적 스케일링 확인 (R² = 0.98).
텍스트: “Copy # / 0.0E+00 ~ 6.E+09”

Figure 5. Transduction of HTX cells (Mini Kit, 다양한 입력량).
입력량: Mock, 2.5 mL, 10 mL, 15 mL.
모든 조건에서 생물학적 활성 유지 확인.


문서 자료

Protocols

Application Notes

Safety Data Sheets


FAQ (Mini Kit 예시)

Q: AAV 시료가 컬럼을 통과하지 않습니다.

  • 원심분리 속도가 낮음 → 1,500 × g 이상 확인
  • 스핀 시간이 부족함 → 추가 2분 스핀
  • 세포 잔여물이 컬럼을 막음 → 상층액만 사용, 필요 시 필터링

Q: AAV 회수율이 낮습니다.

  • pH 조정 불량 → 3.5–3.8로 맞춤
  • 초기 시료 농도 부족 → 벡터 생산 조건 최적화 필요
  • Elution Buffer O 보관 불량 → 4°C에서 밀봉 보관

Q: Elution 후 펠릿이 관찰됩니다.

  • 입력량 과다 가능성 → 상층액 회수 후 펠릿 재정제 권장

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Figure 2
Figure 3
Figure 4
Figure 5

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