Norgen Milk Bacterial DNA Isolation Kit

Norgen Milk Bacterial DNA Isolation Kit

SKU: 21550

우유 내 다양한 세균 종으로부터 유전체 DNA를 빠르고 효율적으로 정제하기 위한 스핀 칼럼 기반 키트입니다.
그람양성균과 그람음성균 모두에 적용 가능하며, 마스티틱 밀크와 같은 난이도 높은 시료에서도 안정적인 결과를 제공합니다.
최소 1 mL의 우유에 포함된 10개의 세균 세포로부터도 DNA를 분리할 수 있으며, 45분 내에 억제물 없는 DNA를 확보하여 PCR, qPCR, Southern Blot, 시퀀싱 등 다양한 후속 분석에 바로 사용할 수 있습니다.

Features and Benefits

• 1 mL 우유 내 최소 10개의 세균 세포로부터 DNA 분리 가능
• 그람양성 및 그람음성 세균 모두 처리 가능
• 마스티틱 밀크 등 점도가 높은 시료에도 적용 가능
• 억제물 없는 DNA로 PCR, qPCR, 시퀀싱 등 다양한 분석에 바로 사용 가능
• 빠르고 효율적인 스핀 칼럼 포맷

Supporting Data

Figure 1. Isolation and Detection of DNA from as Little as 10 Bacterial Cells in 1 mL of Milk

E. coli 세포(10¹, 10³, 10⁵, 10⁷ cells)를 각각 1 mL의 살균 우유에 첨가하여 Norgen Milk Bacterial DNA Isolation Kit로 DNA를 분리하였습니다.
200 µL 용출액 중 1 µL를 20 µL의 실시간 PCR 반응에 사용하였으며, E. coli 특이 프라이머로 검출했습니다.
모든 시료(10세포 포함)에서 DNA가 검출되었습니다.

그래프 정보 (OCR 추출):

• Y축: PCR Base Line-Subtracted CF RFU
• X축: Cycle
• 범례:
  • 🟧 10⁷ Cells
  • 🟩 10⁵ Cells
  • 🔶 10³ Cells
  • 🔷 10¹ Cells
  • 🟨 No Template
• X축 눈금: 0–30
• Y축 눈금: -200~1400
  → 서로 다른 세포 수 및 No Template 조건에서의 PCR 형광 신호(RFU) 변화 곡선을 시각화함.

Figure 2. End-Point PCR of Milk Bacterial DNA Samples

1 mL 우유에 다양한 농도의 _E. coli_를 첨가한 뒤, DNA를 중복으로 분리하여 PCR을 수행하였습니다.
각 PCR 산물(10 µL)을 아가로스 겔에 로딩하여 전기영동 분석을 진행했습니다.
A–D는 세포 수(10⁷, 10⁵, 10³, 10¹ cells)에 해당하며, X는 음성 대조, M은 100 bp DNA Ladder입니다.

겔 밴드 구조 (OCR 추출):

Figure 3. Hierarchical Clustering Dendrogram of Milk-Related Microorganisms

Norgen Milk Bacterial DNA Isolation Kit로 분리한 DNA를 사용하여 Illumina MiSeq 시스템으로 16S 메타유전체 라이브러리를 제작하였습니다.
샘플 간 유전적 유사성을 기반으로 한 계통도와 각 샘플의 속 수준(genus-level) 분류에 따른 상대적 풍부도를 막대그래프로 나타냅니다.

OCR 추출 라벨:
A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K, L, M, N

Kit Specifications

*DNA 수율은 세균 종 및 우유의 지방 함량 등에 따라 달라질 수 있습니다.

Storage Conditions and Product Stability

• 모든 용액은 밀봉하여 실온 보관
• Lysozyme 및 Proteinase K는 도착 즉시 -20°C 보관
• Lysozyme을 첨가한 Resuspension Solution A는 -20°C 보관
• 키트는 출하일로부터 1년간 안정

Kit Components

Documentation

• Protocol (50 prep)
• SDS
• Poster: The Inhibitors of PCR in a Biological Culture (ASCB 2007)
• Poster: Rapid Purification of DNA from Mastitis Bacteria in Milk (ASM 2007)
• Flyer: Microorganism – Solutions for Isolation and Downstream Applications

FAQs

Spin Column 관련

Q1. 컬럼이 막히는 이유는 무엇인가요?

• 샘플 양이 너무 많을 경우 (1 mL 이하 권장)
• 점도가 높은 시료의 경우 18G 주사바늘로 수회 통과
• 초기 스핀 후 상층의 흰색 지방층 제거 필요

Q2. 용해액이 점성이 강한 이유는?

• 흰색 지방층 미제거 또는 세포 과다
• 마스티틱 밀크는 200 µL 이하 사용 권장

Q3. DNA 수율이 낮은 경우 원인은?

• 시료 내 세균 부재
• 세포 용해 불충분 (Proteinase K, Lysozyme 처리 시간 연장)
• DNA 용출 불완전 (14,000 rpm 원심분리 추가)

Q4. DNA가 절단(sheared)된 경우 원인은?

• 과도한 피펫팅 및 진탕
• 혼합 시 vortexing 시간(10–15초 이하) 제한 필요

Citations

다양한 연구에서 본 키트를 활용하여 우유 내 미생물 다양성, 마스티틱 밀크의 병원균 검출, 원유 미생물 군집 분석 등에 적용되었습니다.
(예: Journal of Food Protection 2025, Frontiers in Microbiology 2023, BMC Veterinary Research 2024 등)

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제품 이미지