Takara Lentivirus integration site analysis kit

Takara Lentivirus Integration Site Analysis Kit

Lenti-X Integration Site Analysis Kit은 재조합 렌티바이러스 벡터의 숙주 게놈 내 통합 부위를 정확히 식별할 수 있는 키트입니다. 렌티바이러스의 복제 주기 동안 RNA 게놈의 DNA 복제본이 숙주 게놈에 통합되며, 이 통합 위치는 형질전환 유전자 발현과 숙주 세포의 표현형에 중요한 영향을 미칩니다.
본 키트는 GenomeWalker 기술을 이용하여 이러한 통합 부위를 식별하고, 서열 분석을 통해 확인할 수 있도록 설계되었습니다.

GenomeWalker 절차

1. 형질전환된 클론 또는 세포 집단으로부터 얻은 게놈 DNA를 blunt-end 절단 제한효소로 절단합니다.
2. GenomeWalker 어댑터를 게놈 DNA 라이브러리의 blunt end에 라이게이션합니다.
3. 1차 PCR을 통해 어댑터와 렌티바이러스 서열을 모두 포함하는 DNA 조각을 증폭합니다.
4. 2차 중첩(nested) PCR을 수행하여 단일 주요 PCR 산물을 얻고, 이를 서열 분석하여 통합 부위를 결정합니다.
   여러 밴드가 나타날 경우, 이는 다중 통합 부위를 의미하며 각각 정제 후 개별적으로 서열 분석할 수 있습니다.

구성품 (Kit Components)