Takara Lentivirus integration site analysis kit
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Lentiviral vector의 통합 부위를 정확히 분석하는 키트로, GenomeWalker 기술을 이용해 통합 부위를 증폭 및 서열 분석 가능. 고품질 DNA 정제, 제한효소 절단, PCR 증폭 등 통합 부위 분석에 필요한 모든 구성품 포함.
브랜드: Takara
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Takara Lentivirus Integration Site Analysis Kit
Lenti-X Integration Site Analysis Kit은 재조합 렌티바이러스 벡터의 숙주 게놈 내 통합 부위를 정확히 식별할 수 있는 키트입니다. 렌티바이러스의 복제 주기 동안 RNA 게놈의 DNA 복제본이 숙주 게놈에 통합되며, 이 통합 위치는 형질전환 유전자 발현과 숙주 세포의 표현형에 중요한 영향을 미칩니다.
본 키트는 GenomeWalker 기술을 이용하여 이러한 통합 부위를 식별하고, 서열 분석을 통해 확인할 수 있도록 설계되었습니다.
GenomeWalker 절차
- 형질전환된 클론 또는 세포 집단으로부터 얻은 게놈 DNA를 blunt-end 절단 제한효소로 절단합니다.
- GenomeWalker 어댑터를 게놈 DNA 라이브러리의 blunt end에 라이게이션합니다.
- 1차 PCR을 통해 어댑터와 렌티바이러스 서열을 모두 포함하는 DNA 조각을 증폭합니다.
- 2차 중첩(nested) PCR을 수행하여 단일 주요 PCR 산물을 얻고, 이를 서열 분석하여 통합 부위를 결정합니다.
여러 밴드가 나타날 경우, 이는 다중 통합 부위를 의미하며 각각 정제 후 개별적으로 서열 분석할 수 있습니다.
구성품 (Kit Components)
| 구성품 | 설명 |
|---|---|
| NucleoSpin Tissue Kit | 형질전환된 포유류 세포로부터 고품질 게놈 DNA 정제 |
| 제한효소 3종, 라이게이스, GenomeWalker 어댑터, PCR 프라이머 | 게놈 절단 및 어댑터 라이게이션, PCR 증폭용 |
| Advantage 2 PCR Kit | 게놈 DNA로부터 장거리 증폭을 위한 PCR 시스템 |
| NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up Kit | 증폭된 밴드의 정제 및 회수용 |
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