Thermo Fisher Scientific Flp-In T-REx Core Kit

Invitrogen™ Flp-In™ T-REx™ Core Kit

Flp-In™ T-REx™ 시스템은 특정 유전체 위치에서 테트라사이클린 유도성 발현을 가지는 안정적인 포유류 세포주를 생성할 수 있도록 설계된 시스템입니다.

주요 특징

• FRT 부위를 포함한 Flp-In™ T-REx™ 숙주 세포주가 구축되면, 관심 유전자를 발현하는 안정 세포주를 빠르고 효율적으로 생성 가능
• 동질성(isogenic) 및 유도성(inducible) 안정 세포주 제작 가능
• 안정 발현 세포주의 다클론(polyclonal) 선택 허용

호스트 세포주 생성

Flp-In™ T-REx™ 숙주 세포주를 생성하기 위해 pFRT/_lac_Zeo 및 pcDNA6/TR 벡터를 순차적으로 형질감염합니다.

• pFRT/_lac_Zeo: FRT 부위 포함, _lacZ-Zeocin™ 융합 유전자 하류에 위치
• pcDNA6/TR: 테트라사이클린 억제 단백질(Tet repressor)을 지속적으로 발현하여 TetO2 프로모터 조절 가능

표적 통합 및 발현 조절

유도성 세포주 생성의 다음 단계는 pOG44 및 pcDNA5/FRT/TO 벡터를 숙주 세포주에 공동 형질감염하는 것입니다.

• pcDNA5/FRT/TO: 테트라사이클린 조절 CMV/TetO2 프로모터 하에 관심 유전자를 포함
• pOG44: Flp recombinase를 발현하여 FRT 부위 간 상동 재조합 촉진
  재조합을 통해 관심 유전자가 숙주 염색체에 안정적으로 통합되며, Hygromycin 및 Blasticidin 내성을 통해 선택 및 유지가 가능합니다.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

사양