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1개 옵션 · 카탈로그 번호를 클릭하면 복사됩니다Norgen · Norgen Total RNA Purification Micro Kit
Norgen Total RNA Purification Micro Kit
SKU: 35300
제품 개요
Total RNA Purification Micro Kit는 소량의 세포나 조직에서 총 RNA(미세RNA 포함)를 빠르고 간편하게 정제할 수 있는 키트입니다. 페놀을 사용하지 않으며, 모든 크기의 RNA를 단일 분획으로 정제할 수 있습니다. 20 µL의 소량으로 고품질 RNA를 용출하여 다양한 후속 분석(qRT-PCR, RT-PCR, microarray, NGS 등)에 적합합니다.
주요 특징 및 장점
- 고품질 및 고수율의 총 RNA(미세RNA 포함) 추출
- 페놀 단계 불필요 – 모든 RNA를 단일 분획으로 정제
- 20 µL의 소량으로 RNA 용출 가능
- GC 함량이나 크기에 관계없이 모든 RNA 결합 및 용출
- 소량 세포에서도 민감하고 선형적인 RNA 추출
- 빠르고 편리한 스핀 컬럼 형식
- 다양한 시료(세포, 조직, LCM, CTC 등)에 적용 가능
- Norgen 고유의 실리콘 카바이드 기반 레진 매트릭스 사용
제품 설명
이 키트는 적은 양의 세포나 조직(needle biopsy, LCM, CTC 등)에서 총 RNA를 정제하기에 적합합니다. 모든 크기의 RNA(mRNA, lncRNA, miRNA 등)를 동일한 비율로 정제하며, GC 함량에 따른 편향 없이 높은 순도의 RNA를 얻을 수 있습니다.
Supporting Data
Figure 1. Great Isolation Sensitivity
Norgen의 Total RNA Purification Micro Kit는 단일 세포에서도 민감한 RNA 추출이 가능합니다. HeLa 세포 수를 줄여가며 RNA를 추출한 후, RT-qPCR을 통해 S14 전사를 검출한 결과 단일 세포에서도 검출되었습니다.
Figure 2. High Quality RNA Isolated from Laser-Captured Microdissection (LCM)
LCM 샘플에서 고품질 RNA를 추출할 수 있습니다. 6개의 LCM 샘플에서 RNA 수율과 260/280 비율을 측정한 결과, 높은 순도의 RNA가 얻어졌습니다.
Figure 3. Better Efficiency of RNA Recovery at Single Cell Input
단일 세포 수준에서도 경쟁사 키트보다 높은 RNA 회수율을 보여줍니다. HeLa 세포에서 RNA를 추출하고 RT-qPCR로 S15 및 5S rRNA를 검출한 결과, Norgen 키트의 RNA 발현량이 더 높게 나타났습니다.
Kit Specifications
| 항목 | 사양 |
|---|---|
| 최대 컬럼 결합 용량 | 35 μg |
| 최대 컬럼 로딩 부피 | 650 μL |
| 최소 용출 부피 | 20 μL |
| 정제 가능한 RNA 크기 | 모든 크기 (소형 RNA < 200 nt 포함) |
| 시작 시료량 | 동물 세포: 5 × 10⁵ cells 동물 조직(뇌, 신장, 간, 폐, 비장): 3 mg 심장, 근육: 최대 7.5 mL LCM: 최대 5 × 10⁵ cells |
| 10회 정제 소요 시간 | 약 20분 |
| 평균 수율 (HeLa 세포 1 × 10⁵개 기준) | 약 1.5 μg |
* 섬유성 조직의 경우 추가적인 Proteinase K 처리 필요
저장 조건 및 안정성
모든 용액은 밀봉하여 실온에 보관합니다. 본 키트는 출하일로부터 2년간 안정합니다.
구성품
| 구성품 | Cat. 35300 (50 preps) | Cat. 35350 (250 preps) |
|---|---|---|
| Buffer RL | 40 mL | 5 × 40 mL |
| Wash Solution A | 38 mL | 5 × 38 mL |
| Elution Solution A | 6 mL | 5 × 6 mL |
| Micro Spin Columns | 50 | 250 |
| Collection Tubes | 50 | 250 |
| Elution Tubes (1.7 mL) | 50 | 250 |
| Product Insert | 1 | 1 |
문서 및 자료
- Protocol (50 and 250 prep)
- Supplementary Protocol – Dried Blood Spot RNA Isolation
- Supplementary Protocol – Exosomal RNA Purification
- Safety Data Sheet (50 Prep)
- Safety Data Sheet (250 Prep)
- Product Flyer
FAQs
RNA 회수량이 낮은 이유
- 세포/조직의 불완전한 용해
- 컬럼 막힘 (시료 과량 사용)
- 다른 용출 용액 사용
- 에탄올 미첨가
- Wash Solution A에 에탄올 미첨가
- 세포 또는 조직의 RNA 함량이 낮음
- 세포 단층을 PBS로 세척하지 않음
- LCM 샘플 42°C 30분 인큐베이션 미실시
컬럼 막힘 원인
- 세포/조직 용해 불충분
- 시료 과량 사용
- 높은 genomic DNA 함량
- 원심분리 온도가 낮음 (15°C 이하)
RNA가 분해되는 이유
- RNase 오염
- 절차 수행 지연
- 정제된 RNA의 부적절한 보관 (-70°C 권장)
- 동결 조직의 해동
- RNase 함량이 높은 시료 사용 시 β-mercaptoethanol 추가 필요
후속 분석에서 RNA 성능 저하 원인
- 세척 불충분 (Wash Solution A 3회 필요)
- 에탄올 잔류 (건조 스핀 필수)
genomic DNA 오염 방지
- 시료 과량 사용 시 RNase-Free DNase I 처리 권장
(Norgen RNase-Free DNase I Kit, Cat. 25710)
인용 논문 예시
- Reproduction (2025): Major depressive disorder and anti-depressant therapy markedly alters the human follicular niche DNA methylome
- BMC Endocrine Disorders (2025): Exploring serum miR-33b as a novel diagnostic marker for hypercholesterolemia and obesity
- Journal of Cellular and Molecular Medicine (2025): MicroRNA Expression Profile in Plasma Exosomes of Alcohol-Induced Osteonecrosis
- eBioMedicine (2024): Female mice display sex-specific differences in cerebrovascular function
- Nucleic Acids Research (2024): Short 2'-O-methyl/LNA oligomers as highly-selective inhibitors of miRNA production
관련 서비스
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