Norgen AAV Purification Mini Kit

Norgen AAV Purification Mini Kit

SKU: 63200

Norgen의 AAV Purification Mini Kit는 세포 용해액(cell lysate)과 배양액(cell culture media)으로부터 AAV 벡터를 빠르고 간단하게 정제 및 농축할 수 있는 스핀 컬럼 기반 키트입니다. 특수 장비 없이 다양한 혈청형(AAV6, AAV9 등)에 적용 가능하며, 최대 90%의 회수율을 제공합니다.

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주요 특징 및 장점

• 세포 분획 또는 배양액 등 다양한 시료에서 AAV 정제 가능
• 최대 90%의 높은 회수율
• 특수 장비 불필요
• 다양한 AAV 혈청형 정제 가능 (예: AAV6, AAV9)
• In vitro 및 in vivo 실험용 고활성 AAV 확보
• Norgen의 독자적인 수지 기반 스핀 컬럼 크로마토그래피 이용

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제품 설명

재조합 아데노-관련 바이러스(AAV) 벡터는 유전자 전달 실험에 매우 유용합니다. Norgen의 AAV Purification Kits는 세포 용해액과 배양액으로부터 AAV 벡터를 농축 및 정제하는 빠르고 간단한 절차를 제공합니다. 정제 과정은 Norgen Biotek의 독자적 수지(resin)를 이용한 침전 방식으로 이루어지며, 원심분리를 통해 세포 잔여물 제거 후, 효소 처리로 DNA 및 RNA 오염을 최소화합니다. 결과적으로 얻어진 AAV 벡터는 in vitro 및 in vivo 전이(transduction) 실험에 매우 적합합니다.

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AAV Purification Mini Kit 구성 및 성능

• 처리 용량: 0.5–8 mL (세포 펠릿, 배양액 또는 혼합 시료)
• 최대 50배 농축 가능
• 엘루션 부피: 200 µL
• 4개 샘플 기준 준비 시간: 1.5시간 (핸즈온 약 45분)

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Kit Specifications

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저장 조건 및 안정성

• DNAse I, RNAse A: -20°C 보관
• Elution Buffer O: 4°C 보관
• 기타 용액: 개봉 전 실온, 개봉 후 4°C 보관
• 유효기간: 출하일로부터 1년

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구성품

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Supporting Data

Figure 1. In vitro transduction.
HTX 세포를 AAV9 및 Bovine AAV (AAV-Ca) 벡터로 감염시킨 결과, 알칼리성 포스파타제 리포터 유전자(CAG 프로모터 구동)가 발현된 세포에서 어두운 보라색 염색이 관찰됨.
텍스트: AAV9 Bovine AAV (AAV-Ca)

Figure 2. In vivo transduction.
AAV9 벡터를 생쥐 폐에 비강 투여 후 1개월 뒤 폐 조직에서 알칼리성 포스파타제 유전자 발현이 확인됨.

Figure 3. Transduction of HTX cells using AAV Purification Mini Kit.
정제된 벡터를 HTX 세포에 적용한 결과, 보라색 염색을 통해 생물학적 활성 확인.
텍스트:

Purified Vector
HTX Cells
Control

Figure 4. Linear Scaling of AAV Purification Mini Kit From 2.5 mL to 15 mL.
입력 부피 증가(2.5–15 mL)에 따른 선형 스케일링 확인 (R² = 0.98).
텍스트:

Copy #
2.5 mL     10 mL     15 mL
R² = 0.98
0.0E+00
1.2E+09
2.4E+09
3.6E+09
4.8E+09
6.0E+09

Figure 5. Transduction of HTX cells with different input volumes.
0.5, 2.5, 10, 15 mL 입력 시료에 따른 전이 효율 비교.
텍스트:
| 구분 | 텍스트 |
|------|---------|
| 왼쪽 위 | Mock |
| 오른쪽 위 | 2.5 mL |
| 왼쪽 아래 | 10 mL |
| 오른쪽 아래 | 15 mL |

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Documentation

• AAV Purification Mini Kit Protocol (20 prep)
• Application Note: Purification of AAV Vectors Using Norgen’s AAV Mini and Midi Purification Kits
• Safety Data Sheet (SDS)

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FAQ (Mini Kit)

Q1. AAV 시료가 컬럼을 통과하지 않습니다.

• 원심분리 속도가 너무 낮을 수 있습니다 (최소 1,500 × g 필요).
• 스핀 시간이 부족할 수 있습니다 (2분 추가 스핀 권장).
• 세포 잔여물이 컬럼을 막을 수 있습니다. 0.2 µm 필터로 여과하거나 시료를 여러 컬럼에 분배하세요.

Q2. AAV 회수율이 낮습니다.

• 결합 시료의 pH가 3.5–3.8로 조정되었는지 확인하세요.
• 초기 시료의 AAV 농도가 충분하지 않을 수 있습니다.
• Elution Buffer O를 4°C에서 밀봉 보관하세요.

Q3. 엘루션 후 침전물이 보입니다.
입력량이 너무 많을 수 있습니다. 원심분리 후 상등액을 사용하고, 침전물은 새 컬럼으로 재처리하세요.

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관련 제품

• AAV Quantification Kit
• AAV Purification Mini Kit

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제품 이미지