Norgen Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit
소변 시료(10~30mL)로부터 세포유리 순환 핵산(DNA/RNA)과 바이러스 핵산을 신속하게 정제하는 키트입니다. 모든 크기의 DNA/RNA(마이크로RNA 포함)를 페놀이나 캐리어 RNA 없이 고순도로 추출할 수 있으며, 신선·냉동·보존 소변에 모두 호환됩니다. PCR, qPCR, NGS 등 다양한 분석에 적합합니다.
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Norgen Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit
제품 개요
Norgen의 Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit는 소변 시료(10~30mL)로부터 세포유리 순환 핵산(DNA 및 RNA)과 바이러스 핵산을 빠르고 효율적으로 정제할 수 있는 키트입니다. Norgen의 독자적인 스핀 컬럼 크로마토그래피 기술을 기반으로 하며, 페놀/클로로포름 추출이나 단백질 분해 효소 처리가 필요하지 않습니다.
주요 특징 및 장점
- 모든 크기의 순환 DNA, 순환 및 엑소좀 RNA, 마이크로RNA, 바이러스 DNA/RNA를 한 번의 정제로 분리
- 페놀이나 캐리어 RNA 사용 불필요
- 시료의 GC 함량이나 크기에 관계없이 RNA를 편향 없이 정제
- 신선, 냉동, 보존 소변 모두에 사용 가능
- 엘루션 부피 조절 가능 (50~100 µL)
- 정제된 핵산은 PCR, qPCR, RT-PCR, NGS 등 다양한 다운스트림 분석에 적합
제품 설명
이 키트는 고순도, 고품질, 저억제(cell-free) DNA 및 RNA를 신속하게 정제할 수 있는 방법을 제공합니다. 정제된 핵산은 PCR, qPCR, 메틸화 분석, 노던 블롯, 프라이머 연장, 발현 어레이 분석, NGS 등 다양한 응용에 사용 가능합니다.
배경 정보
소변 내 세포유리 순환 핵산(cfc DNA/RNA)과 엑소좀 RNA는 암 조기 진단, 질병 모니터링, 태아 DNA 검출 등 바이오마커 연구에 유용한 정보를 제공합니다. 소변은 비침습적이며 반복 채취가 가능해 장기 추적 연구에 적합합니다. 또한 단백질 농도가 낮아 핵산 정제가 용이하고, 감염 위험이 낮은 장점이 있습니다.
Kit Variants
| 제품명 | 시료 입력량 | Cat. No. |
|---|---|---|
| Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Mini Kit | 0.25–2 mL | 59900 |
| Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Midi Kit | 2–10 mL | 60000 |
| Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit | 10–30 mL | 60100 |
Supporting Data
Figure 1. Purification of DNA from Different Urine Volumes
Norgen의 Mini Kit(Cat# 59900)를 이용하여 0.5, 1, 2 mL 소변에서 순환 DNA를 정제하였으며, qPCR로 5S rRNA 유전자의 Ct 값을 측정했습니다. 입력 부피가 증가할수록 Ct 값이 선형적으로 감소했습니다.
Average Ct. Value
| Urine Volume | Average Ct. Value |
|---|---|
| 0.5 mL | 28.05 |
| 1 mL | 27.18 |
| 2 mL | 26.26 |
Figure 2. Linearity of DNA Purified from Increasing Urine Volumes
입력 부피 증가에 따른 DNA 정제의 선형성을 평가했습니다.
| Urine Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---|---|---|
| 0.5 mL | 0.36 | 100 |
| 1 mL | 0.66 | 91 |
| 2 mL | 1.25 | 95 |
Figure 3. Inhibitor-Free DNA
PCR 입력량(2, 4, 8 µL)을 달리하여 Ct 변화를 관찰한 결과, 입력량 증가에도 Ct 값이 감소하여 소변 유래 DNA가 PCR 저해물질 없이 정제됨을 확인했습니다.
| PCR Input Volume | 0.5 mL (Ct) | 1 mL (Ct) | 2 mL (Ct) |
|---|---|---|---|
| 2 µL | ~28.5 | ~27.5 | ~26.5 |
| 4 µL | ~27.5 | ~26.5 | ~25.5 |
| 8 µL | ~26.5 | ~25.0 | ~23.5 |
Figure 4. Purification of Cell-Free Circulating and Exosomal RNA
소변 부피별 RNA 정제 효율을 5S rRNA 및 miR-21의 Ct 값으로 평가했습니다.
Panel A – 5S rRNA
| Urine Volume | Average Ct. Value |
|---|---|
| 0.5 mL | 23.38 |
| 1 mL | 22.50 |
| 2 mL | 21.63 |
Panel B – miR-21
| Urine Volume | Average Ct. Value |
|---|---|
| 0.5 mL | 26.23 |
| 1 mL | 25.34 |
| 2 mL | 24.45 |
Figure 5. Linearity of RNA Purified from Increasing Urine Volumes
Panel A – 5S rRNA
| Urine Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---|---|---|
| 0.5 mL | 0.09 | 100 |
| 1 mL | 0.17 | 92 |
| 2 mL | 0.31 | 92 |
Panel B – miR-21
| Urine Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---|---|---|
| 0.5 mL | 0.13 | 100 |
| 1 mL | 0.24 | 95 |
| 2 mL | 0.44 | 92 |
Kit Specifications
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| Minimum Urine Input | 10 mL |
| Maximum Urine Input | 30 mL |
| Size of Nucleic Acid Purified | 모든 크기 (miRNA 및 small RNA 포함, <200 nt) |
| Elution Volume | 50–100 µL |
| Time to Complete 10 Purifications | 40–45분 |
| Average Yields | 시료에 따라 다름 |
Storage Conditions and Product Stability
모든 버퍼는 밀봉 상태로 실온(15–25°C)에서 최대 2년간 보관 가능하며 성능 저하가 없습니다. Lysis Buffer A에 염 침전이 생길 경우 60°C에서 20분간 가열하여 용해시킵니다.
Kit Components
| 구성품 | Cat. 59900 (50 preps) | Cat. 60000 (20 preps) | Cat. 60100 (10 preps) |
|---|---|---|---|
| Binding Solution K | 25 mL | 75 mL | 1×75 mL + 1×25 mL |
| Lysis Buffer A | 30 mL | 20 mL | 20 mL |
| Wash Solution A | 18 mL | 18 mL | 18 mL |
| Elution Buffer F | 6 mL | 6 mL | 6 mL |
| Mini Spin Columns | 50 | 20 | 10 |
| Midi Spin Columns | - | 20 | - |
| Maxi Spin Columns | - | - | 10 |
| Collection Tubes | 50 | 20 | 10 |
| Elution Tubes (1.7 mL) | 50 | 20 | 10 |
| Product Insert | 1 | 1 | 1 |
Documentation
Protocols
- Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Mini Kit (Cat# 59900)
- Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Midi Kit (Cat# 60000)
- Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit (Cat# 60100)
Safety Data Sheets
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