Thermo Fisher Scientific Phospho-AKT1 (Ser473) Monoclonal Antibody (SDRNR), eFluor 450, eBioscience

Thermo Fisher Scientific Phospho-AKT1 (Ser473) Monoclonal Antibody (SDRNR), eFluor 450, eBioscience

Applications and Tested Dilution

• Application: Flow Cytometry (Intracellular staining)
• Tested Dilution: 5 µL (0.5 µg)/test
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Product Specifications

Product Specific Information

Description:
SDRNR 모노클로날 항체는 인간 및 마우스 AKT (Protein Kinase B, PKB)가 Ser473 잔기에서 인산화된 형태를 인식합니다. AKT는 세포 대사, 증식, 생존, 이동 등 다양한 세포 과정에 관여하는 serine/threonine kinase입니다.
AKT1, AKT2, AKT3 세 가지 동형체가 존재하며, T308 및 S473 위치에서의 인산화는 완전한 활성화를 위해 필요합니다. AKT는 Bad, Foxo1, c-Raf, caspase-9 등의 인산화를 통해 세포 사멸을 억제하며, PTEN 및 LY294002에 의해 음성 조절됩니다.
본 SDRNR 클론의 특이성은 ELISA, Flow Cytometry, Western Blotting을 통해 검증되었습니다.

Applications Reported:

• Intracellular staining 후 Flow Cytometric 분석에 사용 가능.

Applications Tested:

• 정상 인간 PBMC를 대상으로 5 µL (0.5 µg)/test 조건에서 검증됨.
• 1 test는 100 µL 최종 부피에서 세포 샘플을 염색하는데 필요한 항체량을 의미하며, 세포 수는 10⁵~10⁸ cells/test 범위에서 경험적으로 결정.

Fluorochrome Information:

• eFluor™ 450은 Pacific Blue™ 대체 형광체로, Violet laser(405 nm)로 여기되고 445 nm에서 방출됩니다.
• 장비가 해당 형광체 검출에 적합한지 확인 필요.

Staining Protocols

• Protocol A (Two-step, cytoplasmic proteins): 표면 및 세포내 단백질 검출에 유연성 제공
• Protocol B (One-step, nuclear proteins): 전사인자 및 인산화 단백질 동시 염색에 적합
• Protocol C (Two-step, Fixation/Methanol): 자극 전후의 phospho-specific 신호 구분에 최적화 (표면 단백질 염색 제한 있음)

자세한 프로토콜은 Flow Cytometry Protocols: Staining Intracellular Antigens for Flow Cytometry에서 확인할 수 있습니다.

Target Information

AKT1 (PKB alpha)는 세포 생존을 조절하는 serine/threonine kinase입니다. 인슐린, PI3K, IGF1 등 다양한 성장 인자에 의해 활성화되며, apoptosis 억제 및 세포 주기 진행을 촉진합니다.
AKT 경로는 암 치료제 개발의 주요 타깃으로 연구되고 있습니다.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

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