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1개 옵션 · 카탈로그 번호를 클릭하면 복사됩니다Norgen · Norgen Total RNA Purification Plus Micro Kit
Norgen Total RNA Purification Plus Micro Kit
SKU: 48500
소량의 세포나 조직에서 microRNA를 포함한 총 RNA를 빠르고 민감하게 정제할 수 있는 키트입니다. gDNA 제거 컬럼을 통해 게놈 DNA를 효율적으로 제거하며, 페놀이나 클로로포름을 사용하지 않아 안전하고 간편합니다. 정제된 RNA는 높은 무결성을 가지며, RT-qPCR, RT-PCR, 노던 블롯 등 다양한 분자생물학적 분석에 바로 사용할 수 있습니다.
주요 특징 및 장점
- microRNA를 포함한 고품질·고수율 총 RNA 추출
- 최소 20 µL의 소량 용출 가능
- 페놀 단계 불필요 – RNA를 단일 분획으로 분리
- gDNA 제거 컬럼 포함으로 게놈 DNA 제거
- RNA 크기나 GC 함량에 관계없이 균일한 결합 및 용출
- 캐리어 RNA 없이도 소수 세포에서 감도 높은 정제 가능
- 빠르고 편리한 스핀 컬럼 방식
- Norgen 고유의 레진 기반 분리 매트릭스 사용
제품 설명
이 키트는 배양 세포, 동물 조직, 미세절제 샘플(LCM 포함) 등에서 총 RNA를 정제하기 위한 신속하고 민감한 방법을 제공합니다. 모든 크기의 RNA(mRNA, rRNA, miRNA, siRNA 포함)를 정제하며, gDNA 제거 컬럼을 통해 DNA를 제거한 후 RNA를 선택적으로 분리합니다. 정제 과정은 페놀/클로로포름을 사용하지 않으며, 최종 RNA는 고순도 상태로 다양한 후속 분석에 사용 가능합니다.
Norgen의 정제 기술
정제는 Norgen의 독자적인 레진을 사용한 스핀 컬럼 크로마토그래피 방식으로 수행됩니다. 세포 또는 조직을 Buffer RL로 용해한 후, gDNA 제거 컬럼을 통해 DNA를 제거하고, RNA를 결합 컬럼에 흡착시킵니다. Wash Solution A로 세척 후 Elution Solution A로 RNA를 용출합니다. 마이크로 스핀 컬럼의 설계로 최소 20 µL까지 용출이 가능합니다.
Supporting Data
Figure 1. Great Isolation Sensitivity.
Norgen의 Total RNA Purification Plus Micro Kit은 단일 세포에서도 RNA를 민감하게 추출할 수 있습니다. HeLa 세포 수를 단계적으로 줄여가며 총 RNA를 추출한 뒤, RT-qPCR로 인간 S14 전사체를 검출하였습니다. 단일 세포에서도 S14 PCR 산물이 검출되었습니다.
그래프 정보 (이미지 OCR 결과 반영):
- Y축: PCR Base Line-Subtracted RFU
- X축: Cycle (11–30)
- Y축 눈금값: -500, 0, 500, 1000, 1500, 2000, 2500
- 범례:
- ● 10⁴ Cells (검정색)
- ● 10³ Cells (주황색)
- ● 10² Cells (초록색)
- ● 10 Cells (빨간색)
- ● 1 Cell (파란색)
- ● No Template (노란색)
Kit Specifications
| 항목 | 사양 |
|---|---|
| Maximum Column Binding Capacity | 35 μg |
| Maximum Column Loading Volume | 650 μL |
| Minimum Elution Volume | 20 μL |
| Size of RNA Purified | 모든 크기 (small RNA <200 nt 포함) |
| Starting Material | Animal Cells: 5 × 10⁵ cells Animal Tissues: 3 mg (대부분 조직, 섬유성 조직은 Proteinase K 처리 필요) LCM: 최대 5 × 10⁵ cells |
| Time to Complete 10 Purifications | 약 22분 |
| Average Yield (HeLa Cells, 1 × 10⁵ cells) | 1.5 μg |
보관 조건: 모든 용액은 밀봉하여 실온 보관. 출하 후 1년간 안정함.
구성품
| 구성품 | Cat. 48500 (50 preps) |
|---|---|
| Buffer RL | 40 mL |
| Wash Solution A | 38 mL |
| Elution Solution A | 6 mL |
| Genomic DNA Removal Column | 50개 |
| RNA Purification Micro Column | 50개 |
| Collection Tubes | 100개 |
| Elution Tubes (1.7 mL) | 50개 |
| Product Insert | 1부 |
문서 자료
- Protocol (50 preps)
- Application Note: RNA/DNA Isolation from Neoteryx™ Mitra Microsampling Device
- SDS (48500)
- Flyer
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FAQ 요약
RNA 회수율이 낮은 경우
- 세포/조직 용해 불완전 → Buffer RL 적정량 사용
- 컬럼 막힘 → 시료량 과다 여부 확인
- Elution Solution A 대신 다른 용액 사용 → 권장 용액 사용
- 에탄올 첨가 누락 → 반드시 첨가
- 세포 RNA 함량 차이로 인한 수율 차이 가능
컬럼 막힘 원인
- 용해 불충분, 시료 과다, gDNA 과다, 원심분리 온도 낮음 등
RNA 분해 원인
- RNase 오염, 절차 지연, 부적절한 보관, 시료 thawing, RNase 함량 높은 조직 등
다운스트림 실험 성능 저하
- 세척 불충분, 에탄올 잔류 가능성
gDNA 오염
- 시료 과량 사용 시 발생 가능 → RNase-Free DNase I Kit (Cat. 25710) 사용 권장
인용 논문 예시
- Regenerative Engineering and Translational Medicine (2025): Tri-Layer Decellularized, Dehydrated Amniotic Membrane Supports Proliferation and Stemness of Limbal Stem Cells
- Molecular Degeneration (2025): Midbrain degeneration triggers astrocyte reactivity and tau pathology in experimental Alzheimer’s Disease
- Experimental Eye Research (2025): Pro-apoptotic shift in human aniridia-derived limbal stromal cells under prolonged high-glucose stress
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