Thermo Fisher Scientific LightShift EMSA Optimization and Control Kit

Thermo Fisher Scientific LightShift EMSA Optimization and Control Kit

Thermo Scientific™ LightShift™ EMSA Optimization and Control Kit는 EMSA(electrophoretic mobility shift assay)를 통해 단백질-DNA 결합 상호작용을 확인하고 특성을 분석하는 고감도 시스템입니다.
이 키트에는 DNA 결합 상호작용을 설정하고 맞춤화할 수 있는 시약과, DNA 및 단백질 추출물로 구성된 대조군 세트가 포함되어 있어 시스템 검증에 적합합니다.

주요 특징

• 핵 추출물에서 미량 단백질 검출 가능
• 방사성 또는 digoxigenin 방식보다 우수한 민감도 제공
• 기존 DNA-단백질 상호작용 조건 적용 가능
• EBNA 제어 시스템 포함으로 신규 사용자에게 유용

작동 원리

LightShift EMSA 검출 원리는 웨스턴 블롯과 유사합니다.
바이오틴이 표지된 duplex DNA를 핵 추출물 또는 정제 인자와 반응시킨 후, 천연 겔(native gel)에서 전기영동합니다. 이후 DNA를 나일론 막으로 전달하고 UV 교차연결 후 streptavidin-HRP로 검출합니다.
표지부터 결과 확인까지 하루 이내에 완료할 수 있습니다.

EMSA의 개요

EMSA는 단백질-DNA 복합체가 자유 DNA보다 느리게 이동한다는 원리를 이용해 결합 여부를 분석하는 기법입니다.
이 방법은 DNA 복제, 전사, 재조합, 수복 등 다양한 세포 과정의 연구에 활용됩니다.

실험 구성 요소

EMSA를 수행하려면 다음이 필요합니다:

• 비오틴 표지된 DNA 표적 (5’ 또는 3’ 말단 표지)
• 단백질 추출물 (핵, 세포질, 또는 전세포)
• 나일론 막 (예: Biodyne B)
• 전기영동 장비

DNA 표지는 Thermo Scientific Biotin 3’ End DNA Labeling Kit (Cat. No. 89818)를 사용하거나 합성 시 비오틴 표지로 제작할 수 있습니다.
단백질 추출물은 NE-PER Nuclear and Cytoplasmic Extraction Reagent Kit (Cat. No. 78833) 등으로 준비할 수 있습니다.

관련 자료

• 단백질-핵산 상호작용 기술 가이드
• 단백질-DNA 상호작용 검출 기술 가이드
• 겔 전이 분석(EMSA) 기술 가이드

관련 제품

• Biotin 3’ End DNA Labeling Kit (Cat. No. 89818)
• NE-PER Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Reagent Kit (Cat. No. 78833)
• Biodyne B Nylon Membrane for Chemiluminescent EMSA (Cat. No. 77016)
• Chemiluminescent Nucleic Acid Detection Module (Cat. No. 89880)
• LightShift Chemiluminescent RNA EMSA Kit (Cat. No. 20158)

추가 자료

• Pierce G2 Fast Blotter를 사용한 Transfer EMSA 겔

제품 사양