Thermo Fisher Scientific Sequenase Version 2.0 DNA Polymerase, 200 U

Sequenase™ Version 2.0 DNA Polymerase

공급업체: Thermo Fisher Scientific
브랜드: Applied Biosystems™

제품 설명

Sequenase™ Version 2.0 DNA Polymerase는 T7 DNA 중합효소의 유전자 변형 형태로, 야생형 효소와 달리 3′→5′ 엑소뉴클레아제 활성이 거의 없습니다.
이 효소는 연장 반응 특성이 뛰어나며, 뉴클레오티드 아날로그(dlTP, 티오-dNTP, 디데옥시-NTP 등)와 결합할 수 있고, DNA의 2차 구조에 의해 억제되지 않고 가닥 변위 합성을 수행할 수 있습니다.
디디옥시 염기서열분석(ddNTP sequencing)에 매우 효과적이며, 엑소뉴클레아제 비활성화가 필요한 다양한 응용에도 적합합니다.

Sequenase Version 2.0은 두 개의 소단위로 구성되어 있습니다.

• E. coli 단백질 티오레독신(MW 12,000)
• 박테리오파지 T7 유전자 5 단백질의 변형 버전(MW 76,000)

유전적 변형(체외 돌연변이 유도에 의한 28 아미노산 제거)을 통해 DNA 중합효소 기능은 유지하면서 엑소뉴클레아제 활성을 제거하였습니다.

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제품 특성

순도

• SDS-PAGE 분석 기준 95% 이상 순도
• 엔도뉴클레아제, 이중가닥 및 단일가닥 엔도뉴클레아제, 엑소뉴클레아제 오염 테스트 완료

저장 완충액

• 20 mM 인산칼륨(pH 7.4)
• 1 mM DTT
• 0.1 mM EDTA
• 50% 글리세롤

분석 조건

• 반응 혼합물(100 μL):
  40 mM Tris-HCl (pH 7.5), 10 mM MgCl₂, 5 mM DTT, 0.3 mM dNTP,
  5 pmol M13 범용 프라이머에 사전 어닐링된 5 μg M13mp18 포함
• 37°C에서 예열 후 효소를 첨가하고 37°C에서 1분간 배양

단위 정의

• 37°C에서 30초 내에 1 nmol의 뉴클레오티드를 산성 불용성 형태로 결합시키는 효소량을 1단위(Unit)로 정의

농도

• 13 units/μL

기능 테스트

• Sequenase Version 2.0 DNA Sequencing Kit (PN 70770)를 사용한 DNA 염기서열 분석으로 검증

포함된 시약

참고 문헌

1. Tabor, S. and Richardson, C. C. (1989) J. Biol. Chem. 264, 6447–6458.
2. Wang, D. et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99, 15687–15692.
3. Paris, M. (1992) Comments 18(3), United States Biochemical Corporation, Cleveland, Ohio.
4. Tabor, S. and Richardson, C. C. (1987) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84, 4767–4771.
5. Tabor, S. and Richardson, C. C. (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86, 4076–4080.

사양

제품 이미지

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