Thermo Fisher Scientific Click-iT TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit

Invitrogen™ Click-iT™ TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit

The Click-iT™ TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit is designed to identify apoptotic cells in tissue and cultured cell samples using a small, highly specific labeling moiety and streptavidin-peroxidase conjugation. After incorporation of the labeling moiety into sites of DNA fragmentation, detection is achieved through a catalyzed “click” reaction that adds a biotin group at these sites. The subsequent addition of streptavidin-peroxidase and peroxidase substrate results in a dark brown signal that can be detected with light microscopy and stored for future analysis.

주요 특징

• 조직 및 세포 샘플 모두에서 세포사멸 검출에 최적화
• 소형 반응기 도입으로 향상된 라벨링 효율
• 낮은 배경과 밝은 신호로 민감도 향상
• 세포 형태, 환경, 세포사멸 신호를 명확히 관찰 가능
• 최대 50회 TUNEL 실험 구성 가능

원리 설명

세포사멸의 후기 단계는 핵 형태 변화, 염색질 응축, 핵막 붕괴 및 DNA 절편화가 특징입니다.
TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase-dUTP nick end labeling) 분석은 단편화된 DNA의 3'-OH 말단에 변형된 dUTP를 terminal deoxynucleotidyl transferase(TdT)가 결합시키는 원리를 기반으로 합니다.
기존 컬러리메트릭 TUNEL 분석은 biotin으로 표지된 dUTP와 streptavidin-peroxidase를 사용하지만, 높은 배경으로 인해 민감도와 특이도가 낮을 수 있습니다.

Click-iT™ TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit는 이러한 한계를 개선하기 위해 알카인(alkyne)으로 변형된 dUTP를 사용합니다. 이 작은 생체직교기능기(bio-orthogonal functional group)는 TdT에 의해 효율적으로 결합되며, 이후 biotin azide와의 click 반응을 통해 고특이적 라벨링을 구현합니다.
Streptavidin-peroxidase(HRP)와 DAB 기질을 추가하여 세포사멸 부위를 갈색으로 시각화할 수 있습니다.

키트 구성 및 사용

본 키트는 조직 또는 세포 샘플에서 세포사멸 검출에 필요한 모든 시약을 포함하며, 최대 50개의 샘플을 독립적으로 분석할 수 있습니다.

사양

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