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1개 옵션 · 카탈로그 번호를 클릭하면 복사됩니다Norgen · Norgen Urine Cell-Free Circulating RNA Purification Mini Kit
Norgen Urine Cell-Free Circulating RNA Purification Mini Kit
SKU: 56900
소변으로부터 순환 RNA 및 엑소좀 RNA를 분리 및 정제하기 위한 키트입니다.
특징 및 장점
- 모든 크기의 순환 RNA 및 엑소좀 RNA(마이크로RNA 포함) 분리 가능
- 다양한 소변 입력 부피에 대응
- 페놀 추출 불필요, Carrier RNA 불필요
- RNA 크기나 GC 함량에 관계없이 무편향적으로 결합 및 용출
- 유연한 용출 부피로 RNA 농축 가능
- 정제된 RNA는 Small RNA Sequencing, PCR, qPCR, NGS 등 다양한 분석에 사용 가능
- Norgen 고유의 스핀 칼럼 크로마토그래피 기반 정제 방식
제품 설명
본 키트는 신선, 보존 또는 냉동 소변 시료로부터 고품질의 순환 RNA, 엑소좀 RNA, 바이러스 RNA를 빠르고 간편하게 정제할 수 있습니다. 모든 정제 구성품이 포함되어 있으며, 소량 시료 처리에 적합합니다. 정제된 RNA는 PCR, qPCR, 메틸화 분석, 노던 블롯, RNase 보호, 발현 분석 및 차세대 시퀀싱(NGS)에 바로 활용할 수 있습니다.
배경
소변 내 무세포 순환 RNA(cf-RNA) 및 엑소좀 RNA는 암 조기 진단, 질병 모니터링, 병원체 검출을 위한 유망한 바이오마커로 주목받고 있습니다.
소변은 비침습적으로 대량 확보가 가능하며, 반복 채취가 용이하고 단백질 농도가 낮아 핵산 정제가 간편합니다.
이러한 특성 덕분에 소변은 혈액이나 조직보다 바이오마커 연구에 유리한 시료입니다.
키트 구성 및 적용 범위
| 제품명 | 샘플 부피 범위 | 특징 |
|---|---|---|
| Mini Kit (Cat. 56900) | 250 µL ~ 2 mL | 소량 시료용 |
| Midi Kit (Cat. 57000) | 2 mL ~ 10 mL | 중간 부피용, 2단계 칼럼 정제 |
| Maxi Kit (Cat. 57100) | 10 mL ~ 30 mL | 대용량 시료용, 고농축 RNA 용출 |
Kit Specifications
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| Sample Volume Range | 250 µL ~ 2 mL |
| Size of RNA Purified | 모든 크기 (small RNA < 200 nt 포함) |
| Minimum Elution Volume | 50 µL |
| Maximum Elution Volume | 100 µL |
| Time to Complete 10 Purifications | 25–30분 |
| Average Yield* | 시료에 따라 다름 |
* 평균 수율 및 RNA 정량 방법은 제품 설명서 6페이지 참조
보관 조건 및 안정성
모든 완충액은 밀봉 상태로 실온 보관합니다. 출하일로부터 2년간 안정하며, Lysis Buffer A에 염 침전이 있을 경우 60°C에서 20분간 가열하여 용해합니다.
구성품
| 구성품 | Cat. 56900 (50 preps) | Cat. 57000 (20 preps) | Cat. 57100 (10 preps) |
|---|---|---|---|
| Binding Solution K | 25 mL | 75 mL | 1×75 mL + 1×25 mL |
| Lysis Buffer A | 30 mL | 20 mL | 20 mL |
| Wash Solution A | 18 mL | 18 mL | 18 mL |
| Elution Solution A | 6 mL | 6 mL | 6 mL |
| Mini Spin Columns | 50 | 20 | 10 |
| Midi Spin Columns | - | 20 | - |
| Maxi Spin Columns | - | - | 10 |
| Collection Tubes | 50 | 20 | 10 |
| Elution Tubes (1.7 mL) | 50 | 20 | 10 |
| Product Insert | 1 | 1 | 1 |
Supporting Data
Figure 1. Purification of Cell-Free Circulating and Exosomal RNA from Different Urine Volumes (Mini Kit)
Norgen Urine Cell-Free Circulating RNA Purification Mini Kit (Cat# 56900)을 사용하여 0.5 mL, 1 mL, 2 mL 소변 시료로부터 RNA를 정제하였습니다. RT-qPCR로 5S rRNA 및 miR-21 증폭을 평가하였으며, 시료 부피 증가에 따라 Ct 값이 선형적으로 감소하였습니다.
A. 5S rRNA Transcript
| Different Urine Volumes | Average Ct. Value |
|---|---|
| 0.5 mL | 21.83 |
| 1 mL | 20.89 |
| 2 mL | 19.94 |
B. miR-21
| Different Urine Volumes | Average Ct. Value |
|---|---|
| 0.5 mL | 32.88 |
| 1 mL | 32.00 |
| 2 mL | 31.00 |
Figure 2. Linearity of RNA Purified from Increasing Urine Volumes (Mini Kit)
A. 5S rRNA Transcript
| Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---|---|---|
| 0.5 mL | 0.27 | 100 |
| 1 mL | 0.52 | 96 |
| 2 mL | 0.99 | 96 |
B. miR-21
| Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---|---|---|
| 0.5 mL | 0.13 | 100 |
| 1 mL | 0.23 | 92 |
| 2 mL | 0.47 | 100 |
Figure 3. Determination of Inhibition in Urine cf-RNA Samples (Mini Kit)
RNA를 0.5 mL, 1 mL, 2 mL 소변에서 정제 후, qPCR 반응에 2µL, 4µL, 8µL의 용출액을 사용했습니다. Ct 값이 입력량 증가에 따라 감소하여, 정제된 RNA에 PCR 억제 물질이 존재하지 않음을 확인했습니다.
| PCR Input Volume | 0.5mL Urine | 1mL Urine | 2mL Urine |
|---|---|---|---|
| 2µL | 약 33 | 약 32 | 약 31 |
| 4µL | 약 27 | 약 26 | 약 25 |
| 8µL | 약 22 | 약 21 | 약 20 |
Figure 4. Purification of Cell-Free Circulating and Exosomal RNA from Different Urine Volumes (Midi Kit)
A. 5S rRNA Transcript
| Urine Volume | Average Ct. Value |
|---|---|
| 2 mL | 19.98 |
| 5 mL | 18.72 |
| 10 mL | 17.76 |
B. miR-21
| Urine Volume | Average Ct. Value |
|---|---|
| 2 mL | 31.03 |
| 5 mL | 29.73 |
| 10 mL | 28.84 |
Figure 5. Linearity of RNA Purified from Increasing Urine Volumes (Midi Kit)
A. 5S rRNA Transcript
| Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---|---|---|
| 2 mL | 0.97 | 100 |
| 5 mL | 2.32 | 96 |
| 10 mL | 4.52 | 97 |
B. miR-21
| Volume | Relative Amount | % of Linearity |
|---|---|---|
| 2 mL | 0.46 | 100 |
| 5 mL | 1.13 | 98 |
| 10 mL | 2.08 | 92 |
Documentation
SDS
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