Thermo Fisher Scientific Zero Blunt PCR Cloning Kit, without competent cells, 20 Reactions

Thermo Fisher Scientific Zero Blunt™ PCR Cloning Kit (without competent cells, 20 Reactions)

Invitrogen™ Zero Blunt™ PCR Cloning Kit는 proof-reading, thermostable DNA polymerase로 증폭된 blunt-end PCR 산물을 고효율(>80%)로 클로닝할 수 있는 간편한 방법을 제공합니다. 이 키트는 다목적 클로닝 벡터 pCR™-Blunt와 ExpressLink™ T4 DNA Ligase를 사용하여, 실온에서 5분 만에 라이게이션 반응을 완료할 수 있습니다.

주요 특징

• 빠르고 간편함: 실온에서 5분 만에 라이게이션 완료
• 높은 효율성: ccdB 유전자를 이용한 양성 선택으로 80% 이상 정확한 삽입체 확보
• 유연한 선택성: Kanamycin 또는 Zeocin™ 내성 선택 가능

pCR™-Blunt 벡터의 구성

• PCR 산물 삽입 부위 양쪽에 EcoR I 절단 부위 존재
• T7 프로모터/프라이머 부위로 in vitro RNA 전사 및 시퀀싱 가능
• M13 Forward 및 Reverse 프라이머 부위 포함으로 시퀀싱 또는 PCR 스크리닝 용이

작동 원리

Zero Blunt™ PCR Cloning Kit는 blunt PCR 단편(또는 임의의 blunt DNA 단편)을 비재조합체(background)가 낮은 상태로 클로닝하도록 설계되었습니다.
pCR™-Blunt 벡터는 E. coli_의 치명적 유전자 _ccdB_를 _LacZα_의 C-말단에 융합시킨 구조로 되어 있습니다. Blunt PCR 산물이 라이게이션되면 _lacZα-ccdB 유전자 융합이 방해되어 양성 재조합체만 생존할 수 있습니다. 비재조합 벡터를 포함한 세포는 배양 시 사멸합니다.

키트 구성

Zero Blunt™ PCR Cloning Kit는 다음과 같은 구성으로 제공됩니다.

• One Shot™ TOPO10 Chemically Competent E. coli 포함 버전 (K2700-20, K2700-40)
• 컴피턴트 셀 미포함 버전 (K2750-20, K2750-40)
• 20회 및 40회 반응용 키트로 제공

제품 사양