Thermo Fisher Scientific Zero Blunt PCR Cloning Kit, 20 Reactions

Invitrogen™ Zero Blunt™ PCR Cloning Kit

The Zero Blunt™ PCR Cloning Kit offers an easy and high-efficiency (>80%) method for cloning blunt-end PCR products amplified with proof-reading, thermostable DNA polymerases. The kit utilizes the pCR™-Blunt vector and ExpressLink™ T4 DNA Ligase to generate ligation products in a five-minute, room-temperature step.

주요 특징

• 빠르고 간편함: 5분 실온 라이게이션으로 신속한 클로닝 가능
• 높은 효율성: ccdB 유전자를 이용한 양성 선택으로 80% 이상 정확한 삽입체 확보
• 유연한 선택성: Kanamycin 또는 Zeocin™ 내성 선택 가능

pCR™-Blunt 벡터 특성

• PCR 산물 삽입 부위 양쪽에 EcoRI 절단 부위 존재
• T7 프로모터/프라이머 부위로 in vitro RNA 전사 및 시퀀싱 가능
• M13 forward/reverse 프라이머 부위로 시퀀싱 또는 PCR 스크리닝에 활용

작동 원리

Zero Blunt™ PCR Cloning Kit는 둔단 PCR 조각(또는 임의의 blunt DNA fragment)을 낮은 비재조합체 배경으로 클로닝하도록 설계되었습니다.
pCR™-Blunt 벡터는 치명적인 E. coli ccdB 유전자를 lacZα C-말단에 융합한 구조를 가지며, blunt PCR 조각의 라이게이션 시 이 융합 유전자의 발현이 방해되어 양성 재조합체만 생존합니다. 비재조합 벡터를 포함한 세포는 배양 시 사멸됩니다.

키트 구성

Zero Blunt™ PCR Cloning Kit는 다음과 같은 구성으로 제공됩니다:

• One Shot™ TOPO10 Chemically Competent E. coli 포함 버전 (K2700-20, K2700-40)
• Competent cell 미포함 버전 (K2750-20, K2750-40)
• 20회 및 40회 반응용 키트 사이즈 제공

사양