Norgen Urine Cell-Free Circulating DNA Purification Midi Kit

Norgen Urine Cell-Free Circulating DNA Purification Midi Kit

SKU: 56700
고품질, 고순도, 억제물 없는 셀프리 순환 DNA를 소변으로부터 정제 및 농축하는 키트입니다.

주요 특징 및 장점

• 신선, 보존 또는 냉동 소변 시료에서 모든 크기의 순환 DNA 정제
• 바이러스 DNA 동시 정제 가능
• 다양한 소변 투입 부피(2–10 mL)에 대응
• 유연한 용출 부피로 DNA 농축 가능
• 억제물 없는 셀프리 순환 DNA 확보
• Norgen Urine Preservative 및 타사 보존제와 호환
• Norgen 독자적 수지 기반 스핀 칼럼 크로마토그래피 기술 적용

제품 설명

이 키트는 소변 시료로부터 순환 DNA 및 바이러스 DNA를 빠르고 간편하게 정제·농축할 수 있는 솔루션입니다. 모든 정제 구성품이 포함되어 있으며, 정제된 DNA는 PCR, qPCR, 메틸화 PCR, Southern blot, microarray, NGS 등 다양한 응용에 적합합니다.

배경

셀프리 순환 DNA(cf-DNA)는 암 조기 진단 및 질병 모니터링용 바이오마커로 주목받고 있습니다.
소변은 비침습적으로 대량 확보가 가능하며, 반복 채취가 용이해 종적 연구에 적합합니다.
소변 기반 핵산 분석의 장점:

1. HIV 비감염성 및 낮은 병원체 감염 위험
2. 혈장/혈청과 유사한 핵산 프로파일
3. 단백질 농도가 낮아 정제가 용이 (혈액 대비 약 1000배 낮음)

cf-DNA는 일반적으로 150–250 bp 크기의 단편 형태로 존재하며, 세포사멸, 괴사, 태아 유래 DNA 등에서 기원합니다.

Workflow (이미지 OCR 반영)

Urine Cell-Free Circulating DNA Purification Midi Kit (Cat.#56700)
2–10 mL의 소변을 단순한 2단계 칼럼 절차로 처리하여 50 μL로 농축

왼쪽 단계

1. Cell-Free Urine: Binding Solution K 첨가 후 교반
2. 칼럼으로 이동 → 세척 후 유출액 폐기
3. 0.4 mL 용출
4. Proteinase K 첨가, 55°C에서 10분 반응

오른쪽 단계

1. 농축 단계 진행: Lysis Buffer A, Ethanol 첨가 후 교반
2. Mini Spin Column으로 이동
3. 원심분리 및 반복
4. 잔여 혼합물 이동
5. 2회 세척
6. 50 μL 용출 (선택적으로 재용출 가능)
7. DNA는 다운스트림 분석에 바로 사용 가능

Kit Specifications

* 평균 수율 및 DNA 정량 방법은 제품 설명서 6페이지 참조

보관 조건 및 안정성

• 모든 용액은 밀봉 상태로 실온 보관
• 출하일로부터 2년간 안정
• Proteinase K는 완충 저장용액에 용해되어 있으며, 실온에서 2년간 안정

구성품

Supporting Data (일부 OCR 반영)

Figure 4. Purification of cell-free circulating DNA from different urine volumes
| Urine Volume | Average Ct. Value |
|---------------|-------------------|
| 2 mL | 25.28 |
| 5 mL | 23.96 |
| 10 mL | 23.07 |

Figure 5. Linearity of DNA purified from increasing urine volume
5S rRNA 유전자의 상대적 회수율은 5 mL 대비 10 mL에서 약 93% 유지되며, 높은 선형성을 보임.

Figure 6. Detection of the human 5S gene
PCR 입력량 증가(2, 4, 8 µL)에 따라 Ct 값이 감소하여 억제물 없는 DNA 정제가 확인됨.

문서 자료

• Urine Cell-Free Circulating DNA Purification Midi Kit - Protocol (20 Preps)
• SDS - Urine Cell-Free Circulating DNA Purification Midi Kit
• Application Note 82 - DNA Molecular Weight Determination
• Urine Biomarker Research Brochure

FAQ 주요 요약

• 모든 원심분리는 실온에서 수행
• 시료 내 억제물 최소화로 qPCR 등 응용에 적합
• 단백질 농도가 낮은 소변 시료는 정제 효율이 높음
• 동결 소변 시료는 해동 후 바로 사용 가능 (추가 원심분리 불필요)
• Proteinase K는 별도 구매 가능 (Cat. 28229)

제품 이미지