Norgen Small RNA Library Prep Kit for Illumina (Indexes 25-48)

Norgen Small RNA Library Prep Kit for Illumina (Indexes 25-48)

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Illumina 플랫폼용 소형 RNA 라이브러리 제작 키트로, 낮은 입력 RNA(최소 50pg)에서도 고품질 라이브러리 생성 가능. 5시간 이내 빠른 준비, 겔 정제 불필요. 혈액, 혈장, 혈청, 소변 등 다양한 시료에 최적화된 프로토콜 제공. Norgen의 특허 정제 기술로 높은 회수율 보장.

브랜드: Norgen

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장비
63620
Norgen Small RNA Library Prep Kit for Illumina (Indexes 25-48)
CAS: -단위: pk
재고문의재고: -
2,666,000
(VAT포함)2,932,600
장비
63620
재고문의재고: -
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Norgen Small RNA Library Prep Kit for Illumina (Indexes 25–48)

제품 개요

Illumina 플랫폼에서 차세대 시퀀싱(NGS)을 위한 소형 RNA 라이브러리를 생성하기 위한 모든 시약과 구성품을 포함한 키트입니다. 어댑터, 프라이머, 효소 혼합물 및 버퍼를 포함하며, Norgen의 특허 수지 기술을 활용한 정제 모듈이 제공되어 라이브러리 중간체 및 최종 산물의 회수율을 향상시킵니다.


주요 특징 및 장점

  • 낮은 입력 RNA(최소 1ng, 혈장·혈청 등 체액 시료)에 최적화
  • 5시간 이내 간편하고 빠른 워크플로우
  • 특정 시료 유형에서 겔 정제 불필요
  • 혈액, 혈장, 혈청, 소변 등 다양한 시료에 적용 가능
  • Norgen의 Total RNA 정제 기술과 완벽 호환

Workflow

단계 설명 소요 시간
1 Input – Total RNA or enriched Small RNA
2 3’ Adaptor Ligation Kit 65 mins
3 Removal of Excess 3’ Adaptor 25 mins
4 5’ Adaptor Ligation Kit 65 mins
5 cDNA Synthesis Kit 65 mins
6 PCR Amplification and Indexing Kit 30 mins
7 NGS Reaction Clean-up Kit 20 mins

Optional 단계: Size Selection by PAGE, Library Purification
최종 단계: Library ready for Illumina sequencing


Supporting Data

Figure 1. Purified Small RNA Library (Agilent 2100 Bioanalyzer)

Synthetic microRNAs를 입력으로 사용하여 제조된 라이브러리에서 약 141 bp 단일 피크가 확인됨. Illumina 시퀀싱에 직접 사용 가능.

데이터 포인트 (FU 단위):
35, 141, 232, 246, 331, 416, 457, 528, 676, 761, 1216, 2143, 3057, 10180


Figure 2. Small RNA Library (6% Novex® TBE PAGE Gel)

Lane 설명
1 NGS MW Ladder
2 NGS Control Ladder
3 Sample Library
밴드 크기 (bp) 비고
Library ~140 bp 샘플 라이브러리
Adaptor Dimer ~120 bp 절단 시 제외

Figure 3. Reproducibility of Small RNA Libraries

혈장 RNA(200 µL EDTA-plasma)로부터 제조된 4개 복제 샘플 간 평균 상관계수 99.3% 확인.

Replicate R² 값
#1 0.997, 0.9936, 0.9922
#2 0.9915, 0.9892
#3 0.9992
Average 99.3%

Figure 4. Blood Sample Correlation Analysis

시료 유형 복제 간 R²
Paxgene 0.9997
Tempus 0.9991
Whole Blood 0.9991

Panel B: Whole Blood, Tempus, Paxgene 모두 유사한 microRNA 검출 수 확인
Panel C: 시료 간 상호 상관계수

  • Paxgene vs Tempus: R² = 0.9839
  • Whole Blood vs Paxgene: R² = 0.9797
  • Whole Blood vs Tempus: R² = 0.9932

Kit Specifications

항목 내용
Number of preps 6 or 24
Number of indices provided 6 (6 preps) 또는 12 (24 preps, Indexes 1–24 또는 25–48)
Time required 약 5시간
Input RNA required 최소 50 pg

Storage Conditions and Product Stability

일부 구성품은 -20°C, 4°C 또는 실온 보관 필요. 각 구성품 및 박스 라벨을 참고하십시오.


구성품 (Cat. 64600, 24 preps)

Step Component Volume
3’ Adaptor Ligation 3’ Adaptor 30 µL
Ligation Master Mix 320 µL
T4 RNA Ligase 2 (Truncated) 35 µL
5’ Adaptor Ligation 5’ Adaptor 30 µL
Ligation Master Mix 320 µL
T4 RNA Ligase 1 35 µL
cDNA Synthesis Reverse Primer 30 µL
Master Mix 220 µL
TruScript Reverse Transcriptase 35 µL
PCR Amplification 2x NGS PCR Master Mix 1.32 µL
PCR Reverse Primer 81 µL
Forward Index Primer 별도 제공 (#64640 또는 #64610)
Size Selection NGS MW Ladder 50 µL
NGS Control Ladder 50 µL
Loading Dye 300 µL
Nuclease-Free Water 1.25 µL

Purification Module (Cat. 63500, 75 preps)

Component Volume / 수량
Buffer RL 40 mL
Wash Solution A 38 mL (재구성 후 128 mL)
Elution Solution A 6 mL
Columns 75
Gel Filtration Columns 24
Collection Tubes 75
Elution Tubes 75
Product Insert 1

Documentation


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제품 이미지

  1. Workflow
  2. Figure 1
  3. Figure 2
  4. Figure 3
  5. Figure 4

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