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1개 옵션 · 카탈로그 번호를 클릭하면 복사됩니다Norgen · Norgen Plasma/Serum RNA Purification Kit
Norgen Plasma/Serum RNA Purification Kit
SKU: 55000
공급업체: Norgen Biotek
제품 개요
혈장 및 혈청 시료에서 순환 RNA와 엑소좀 RNA를 빠르고 간단하게 정제할 수 있는 키트입니다. 모든 크기의 RNA(마이크로RNA 포함)를 분리하며, 페놀 추출이나 캐리어 RNA가 필요하지 않습니다. 고품질 RNA를 다양한 하류 응용(PCR, qPCR, NGS 등)에 사용할 수 있습니다.
특징 및 장점
- 모든 크기의 순환 및 엑소좀 RNA 분리 가능 (microRNA 포함)
- 혈장/혈청 시료의 다양한 입력 범위 지원
- 페놀 추출 불필요, 캐리어 RNA 불필요
- GC 함량 및 크기와 무관하게 모든 RNA를 균일하게 결합 및 용출
- 유연한 용출 부피로 RNA 농축 가능
- Small RNA Sequencing 등 다양한 하류 응용에 적합
- Streck Cell-Free RNA BCT® 튜브와 호환
- Norgen 고유의 수지 기반 스핀 컬럼 크로마토그래피 방식 적용
키트별 구성 및 용량
Plasma/Serum RNA Purification Mini Kit
- 시료 용량: 50 µL ~ 200 µL
- 최종 용출 부피: 10 µL ~ 25 µL
Plasma/Serum RNA Purification Midi Kit
- 시료 용량: 250 µL ~ 1.5 mL
- 2단 컬럼 방식
- 최종 용출 부피: 50 µL ~ 100 µL
Plasma/Serum RNA Purification Maxi Kit
- 시료 용량: 2 mL ~ 5 mL
- 2단 컬럼 방식
- 최종 용출 부피: 50 µL ~ 100 µL
정제 원리
스핀 컬럼 크로마토그래피 기반의 Norgen 고유 수지 매트릭스를 사용하여 RNA를 선택적으로 결합 및 정제합니다. EDTA 또는 Citrate로 채혈된 혈액에서 준비된 혈장/혈청 시료에 적합하며, Heparin 시료는 RT-PCR 등 하류 분석에 간섭을 일으킬 수 있으므로 사용하지 않습니다.
응용 분야
정제된 RNA는 다음과 같은 하류 응용에 적합합니다.
- PCR, qPCR, RT-PCR
- 메틸화 민감 역전사 qPCR
- 노던 블롯, RNase 보호, 프라이머 연장
- Expression array assay
- Small RNA 및 NGS 분석
배경
혈장/혈청의 세포유리 순환 RNA 또는 엑소좀 RNA는 암 및 질병 상태의 바이오마커로 활용될 수 있습니다. 엑소좀은 다양한 체액에 존재하며, 세포 간 신호 전달 및 면역 반응 조절, 조직 재생 등 생리적 역할을 수행합니다. 엑소좀 내부 RNA는 RNase에 의해 분해되지 않아 안정적으로 회수 가능합니다.
Kit Specifications
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| Sample Volume Range | 50 ~ 200 µL |
| Anti-coagulant (for Plasma) | EDTA 또는 Citrate |
| Size of RNA Purified | 모든 크기 (small RNA < 200 nt 포함) |
| Minimum Elution Volume | 10 µL |
| Maximum Elution Volume | 25 µL |
| Time to Complete 10 Purifications | 15~20분 |
| Average Yield | 시료에 따라 다름 |
Storage Conditions and Stability
- 모든 용액은 밀봉하여 실온에서 보관
- 출하일로부터 2년간 안정
- Lysis Buffer A에 염 침전이 있을 경우 60°C에서 20분간 가온 권장
Kit Components
| 구성품 | Cat. 55000 (50 preps) | Cat. 56100 (20 preps) | Cat. 56200 (10 preps) |
|---|---|---|---|
| Lysis Buffer A | 2 × 20 mL | 100 mL | 130 mL + 30 mL |
| Wash Solution A | 18 mL | 38 mL + 18 mL | 38 mL |
| Elution Solution A | 6 mL | 6 mL | 6 mL |
| Elution Buffer F | - | 15 mL | 15 mL |
| Micro Spin Columns | 50 | - | - |
| Mini Spin Columns | - | 20 | 10 |
| Midi Spin Columns | - | 20 | - |
| Maxi Spin Columns | - | - | 10 |
| Collection Tubes | 50 | 20 | 10 |
| Elution Tubes (1.7 mL) | 50 | 20 | 10 |
| Product Insert | 1 | 1 | 1 |
Supporting Data
Figure 1. 순환 RNA 정제 효율은 혈장 입력량 증가에 따라 선형적으로 증가함.
Figure 2. 용출 부피에 따른 RNA 농축 효율 확인.
Figure 3. 경쟁사 대비 높은 miRNA 회수율.
Figure 4. 50 µL 혈장에서도 Small RNA Sequencing 가능.
[OCR 이미지 2의 데이터 통합]
Small RNA Sequencing 결과 요약 (Cat. 55000)
| Plasma Volumes | # of miRNAs Detected (10 µL Elution) |
|---|---|
| 50 µL | 291 |
| 200 µL | 328 |
| 4 mL | 305 |
Venn Diagram 요약
- 3개 그룹 공통 miRNA: 178
- 50 µL & 200 µL 공통: 19
- 200 µL & 4 mL 공통: 4
- 50 µL & 4 mL 공통: 1
산점도 상관관계
- 50 µL vs 4 mL Plasma: R² = 0.9678
- 200 µL vs 4 mL Plasma: R² = 0.9905
OCR 이미지 1의 워크플로우 통합
Plasma/Serum RNA Purification Maxi Kit (Cat.#56200) Workflow
- 2~5 mL 혈장/혈청에 Lysis Buffer A, Isopropanol 첨가 후 vortex
- 컬럼에 로드 후 flowthrough 폐기
- 세척 후 800 µL로 1차 용출
- Lysis Buffer A, Isopropanol 재첨가 및 vortex
- 농축 단계로 이동하여 mini spin column에 전이
- 세척 3회 후 50 µL로 최종 용출
- RNA는 하류 분석에 바로 사용 가능
Documentation
Safety Data Sheets
FAQs 요약
- 원심분리: 실온에서 수행 가능
- 시약 부피 조절 시 RNA 품질/수율 영향
- Dry spin 누락 시 Wash Solution A 오염 가능
- 2차 용출은 가능하나 첫 용출과 분리 권장
- 낮은 A260/280 비율은 짧은 RNA 특성으로 문제 없음
- Streck Cell-Free RNA BCT® 튜브 호환
- lncRNA도 정제 가능
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