Thermo Fisher Scientific EZ-Link Desthiobiotinylation and Pull-Down Kit

Thermo Scientific™ EZ-Link™ Desthiobiotinylation and Pull-Down Kit

Thermo Scientific EZ-Link Desthiobiotinylation and Pull-Down Kit는 정제된 단백질을 비오틴 유사체로 표지하고, 스트렙타비딘 아가로스 수지를 이용해 단백질 상호작용 복합체를 온화한 조건에서 정제할 수 있는 완전한 시약 세트입니다.

주요 특징

• Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin: 스트렙타비딘에 특이적으로 결합하나, 부드러운 조건에서 쉽게 용출되는 비오틴 유사체로 단백질 표지.
• Pull-down assay: 단순하고 최적화된 프로토콜로 단백질 상호작용 복합체를 기능적으로 회수.
• Complete kit: 라벨링 시약, 탈염 컬럼, 스트렙타비딘 아가로스 및 용출 버퍼 포함.

제품 설명

이 키트는 아민 반응성 NHS-에스터 형태의 Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin을 사용하여 정제된 단백질 또는 혼합 단백질 샘플을 효과적으로 표지합니다. 표지된 단백질의 desthiobiotin 태그는 스트렙타비딘에 높은 특이성으로 결합하나, 자유 비오틴을 이용한 경쟁적 치환으로 부드럽게 용출됩니다. 이를 통해 세포 용해물에서 특정 단백질 상호작용 복합체를 효과적이고 온화하게 포획 및 분리할 수 있습니다.

키트에는 1 mg 바이알 형태의 desthiobiotinylation 시약, 탈염 컬럼, 고용량 스트렙타비딘 아가로스 및 버퍼가 포함되어 있으며, 마이크로원심관 규모의 여러 pull-down 실험을 손쉽게 수행할 수 있습니다. 알려진 단백질(미끼)과 미확인 상호작용 대상(먹이) 간의 새로운 결합을 규명하거나, 기존 상호작용을 확인하는 데 유용합니다.

Desthiobiotin은 황이 없는 단일 고리 구조의 비오틴 유사체로, 스트렙타비딘에 거의 동일한 특이성을 가지지만 결합 친화도는 낮습니다(1/Kd = 10¹¹ vs. 10¹⁵M). 이로 인해 desthiobiotin으로 표지된 단백질은 자유 비오틴을 이용해 경쟁적으로 부드럽게 용출될 수 있습니다. 이러한 특성은 내생적 비오틴 결합 단백질의 동시 정제를 최소화하며, 복합체 손상 없이 타깃 단백질을 회수할 수 있게 합니다.

Desthiobiotin 기반 기술은 퓨전 태그 없이 발현된 단백질이나 세포 표면 단백질 등 네이티브 조건에서의 단백질 포획 및 분리에 이상적입니다. Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin은 긴 스페이서 암을 가진 sulfo-NHS ester 형태로, 단백질의 1차 아민(-NH₂)을 안정적으로 표지합니다. No-Weigh Format(1 mg 재밀봉 바이알)은 소량 시약 취급의 어려움을 줄이고 미사용 시약의 가수분해를 방지합니다.

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• Pierce™ Biotinylated Protein Interaction Pull-Down Kit

제품 사양