Thermo Fisher Scientific EZ-Link NHS-Desthiobiotin

Thermo Fisher Scientific EZ-Link™ NHS-Desthiobiotin

Thermo Scientific™ EZ-Link™ NHS-Desthiobiotin은 짧고 세포막을 투과할 수 있는 아민 반응성 라벨링 시약으로, 비오틴 유사 그룹이 스트렙타비딘으로부터 용출되어 세포 내 단백질 표지 및 정제에 이상적입니다.

주요 특징

• Desthiobiotin: 비오틴의 아날로그로, 스트렙타비딘으로부터 용출이 용이하여 친화 정제에 적합
• 단백질 라벨링: 정제 또는 혼합 시료 내 항체 및 단백질 표지 가능, 스트렙타비딘 비드를 이용한 pull-down assay에 활용
• 세포 투과성: 작은 비전하 분자로 세포막을 쉽게 통과하여 세포 내 라벨링 가능
• 아민 반응성: 1차 아민(-NH₂)과 반응하여 안정적인 결합 형성 (라이신 잔기나 폴리펩타이드 N-말단 등)

제품 설명

NHS-Desthiobiotin은 NHS 에스터 형태로 활성화되어 단백질 또는 기타 분자의 1차 아민(-NH₂)을 데스티오비오틴 그룹으로 공유 결합 표지합니다. 데스티오비오틴 태그는 스트렙타비딘 및 기타 비오틴 결합 단백질에 높은 특이성을 가지며, 자유 비오틴을 이용한 경쟁적 치환으로 부드럽게 용출될 수 있습니다. 따라서 변성되지 않은 조건에서 단백질을 회수해야 하는 애비딘-비오틴 기술에 유용한 대안입니다.

이 시약은 비전하성이고 세포막 투과성이 있어, 살아있는 세포 내 단백질 표지에도 사용할 수 있습니다.

Desthiobiotin vs. Biotin

Desthiobiotin은 황이 없는 단일 고리 구조의 비오틴 아날로그로, 스트렙타비딘에 거의 동일한 특이성으로 결합하지만 결합 친화도는 낮습니다 (1/Kd = 10¹¹ vs. 10¹⁵ M).
따라서 데스티오비오틴으로 표지된 단백질은 자유 비오틴을 이용한 경쟁적 치환으로 부드럽게 용출할 수 있으며, 내생성 비오틴화 단백질의 동시 정제를 최소화합니다.
이 시스템은 강한 용출 조건을 피할 수 있어 단백질 복합체 또는 세포 구조 손상을 방지합니다.

NHS Ester 라벨링 원리

NHS 에스터 형태의 비오틴은 가장 널리 사용되는 비오틴화 시약으로, 알칼리성 조건에서 1차 아민(-NH₂)과 반응하여 안정적인 아마이드 결합을 형성합니다.
단백질의 라이신 잔기 및 N-말단 아민이 주요 반응 부위이며, Sulfo-NHS 에스터는 수용성이지만 세포 투과성이 낮고, 일반 NHS 에스터는 수용성은 낮지만 세포 투과성이 높습니다.

제품 사양

제품 이미지

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