
Norgen Plasma/Serum cfc-DNA/cfc-RNA Advanced Fractionation Kit
혈장/혈청에서 cfc-DNA, cfc-RNA, exosomal RNA를 동시에 분리 정제하는 고급 키트. 1~6 mL 시료에서 모든 크기의 핵산을 45분 내에 정제 가능. 페놀이나 carrier RNA 불필요하며, 높은 순도의 RNA/DNA 확보. 자동 및 수동 방식 모두 호환.
- 브랜드
- Norgen
- 카테고리
- RNA/DNA Reagents
- 판매단위
- pk
카탈로그
1개 옵션 · 카탈로그 번호를 클릭하면 복사됩니다Norgen · Norgen Plasma/Serum cfc-DNA/cfc-RNA Advanced Fractionation Kit
Norgen Plasma/Serum cfc-DNA/cfc-RNA Advanced Fractionation Kit
SKU: 68300
혈장 또는 혈청에서 세포유리 순환 DNA(cfc-DNA), 순환 종양 DNA(Ct-DNA), 순환 RNA 및 exosomal RNA(마이크로RNA 포함)를 동시에 신속하고 간단하게 분리 및 정제할 수 있는 키트입니다.
Features and Benefits
- 1 mL ~ 6 mL의 다양한 혈장/혈청 시료 입력 가능
- 페놀 추출 및 carrier RNA 불필요
- 고분자 gDNA 오염 최소화
- 크기나 GC 함량에 관계없이 모든 RNA 결합 및 용출 가능
- 25 µL ~ 50 µL의 유연한 용출 부피에서 순환 RNA 및 exosomal RNA 농축
- 45분 내에 고품질 RNA 정제
- 정제된 RNA는 Small RNA Sequencing 등 다양한 다운스트림 응용에 적합
- Norgen의 독자적 수지 기반 스핀 컬럼 크로마토그래피 기술 사용
Product Description
이 키트는 1~6 mL의 혈장/혈청으로부터 모든 크기의 순환 DNA 및 RNA를 두 개의 별도 용출액으로 분획(fractionation)하는 빠르고 신뢰성 높은 방법을 제공합니다.
신선, 보존 또는 냉동된 시료 모두 사용 가능하며, 25~50 µL 범위의 유연한 용출 부피를 제공합니다.
정제된 핵산은 PCR, qPCR, 메틸화 민감 PCR, Southern blot, 마이크로어레이, NGS 등 다양한 응용에 바로 사용 가능합니다.
Supporting Data
Figure 1. Bioanalyzer RNA Pico Chip 및 High Sensitivity DNA Chip 분석 결과로, 4 mL K2 EDTA 혈장에서 자동 및 수동 방식으로 동시에 정제된 RNA 및 DNA의 품질과 양을 보여줍니다.
패널 A~D는 각각 자동/수동 방식의 DNA 및 RNA 분획 결과를 나타냅니다.
공통적으로 x축은 Time, y축은 Intensity이며, 주요 피크 값은 620 및 670입니다.
Figure 2. RT-qPCR 분석 결과
4 mL K2EDTA 혈장에서 정제된 RNA 분획으로부터 miR-21 및 miR-16의 증폭 결과를 나타냅니다. 자동 및 수동 분리 간 Ct 값 차이는 거의 없습니다.
| Isolation Method | miR-21 | miR-16 |
|---|---|---|
| Manual Isolation | 19.06 | 19.56 |
| Automated Isolation | 18.87 | 19.52 |
Figure 3. Real-Time PCR 분석 결과
DNA 분획으로부터 ALU 247 및 ALU 115 증폭 결과를 보여줍니다. 자동 및 수동 분리 간 차이가 없습니다.
| Isolation Method | ALU 247 | ALU 115 |
|---|---|---|
| Manual Isolation | 15.62 | 16.82 |
| Automated Isolation | 15.54 | 16.04 |
Kit Specifications
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| Minimum Plasma/Serum Input | 1 mL |
| Maximum Plasma/Serum Input | 6 mL |
| Size of cfc-RNA Purified | 모든 크기 (miRNA 및 <200 nt 포함) |
| Optimal size of purified cfc-DNA | 146 - 180 bp |
| Elution Volume | 25 - 50 µL |
| Time to Complete 10 Purifications | 45분 |
| Average Yields* | 시료에 따라 다름 |
*자세한 평균 수율은 제품 매뉴얼 5페이지 참고.
Storage Conditions and Product Stability
모든 용액은 밀봉하여 실온에서 보관합니다.
키트는 출하일로부터 2년간 안정합니다.
Proteinase K는 특수 완충 용액에 녹아 있으며, 실온에서 2년간 안정합니다.
Kit Components
| Component | Cat. 68300 (50 preps) |
|---|---|
| Binding Buffer A | 20 mL |
| Proteinase K | 6.5 mL |
| Slurry E | 12.5 mL |
| Lysis Buffer A | 130 mL |
| Wash Solution A | 2 × 38 mL |
| Elution Buffer C | 2 × 8 mL |
| Elution Buffer F | 1 × 6 mL, 1 × 15 mL |
| Elution Solution A | 6 mL |
| Micro Spin Columns | 100 |
| Mini Filter Spin Columns | 50 |
| Collection Tubes | 150 |
| Elution Tubes (1.7 mL) | 150 |
| Product Insert | 1 |
Documentation
FAQs
Q1. 가변 속도 원심분리기가 없을 경우?
A. 고정 속도 원심분리기도 사용 가능하지만 수율이 감소할 수 있습니다.
Q2. 원심분리 온도는?
A. 모든 단계는 실온에서 수행합니다. 4°C에서도 성능 저하 없음.
Q3. 시약 부피를 변경하면?
A. 품질 및 수율이 감소할 수 있습니다. 용출 부피가 크면 수율이 증가하나 농도는 낮아집니다.
Q4. 최종 용출 전 건조 스핀을 생략했다면?
A. Wash Solution A가 잔류하여 품질 저하 및 후속 실험 간섭이 발생할 수 있습니다.
Q5. 2차 용출이 가능한가요?
A. 가능합니다. 1차 용출 부피의 50%로 별도 튜브에 수행을 권장합니다.
Q6. 인큐베이션 시간이 달라졌다면?
A. 핵산 수율이 감소할 수 있습니다.
Q7. RNA 수율이 낮은 경우?
A. 혈장/혈청 내 핵산 함량이 개인차가 큽니다. 시료량을 늘리면 수율 향상 가능.
Q8. 정제된 핵산이 응용에서 잘 작동하지 않는다면?
A. 제공된 용출 완충액 외의 버퍼를 사용했을 경우, 염, EDTA, 계면활성제 등 간섭 성분을 확인해야 합니다.
Citations
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| Title | Detecting KRAS Mutations in Peripheral Blood Extracellular Vesicles in Non-Small Cell Lung Cancer Using Digital Droplet PCR |
| Journal | Journal of Thoracic Oncology, 2023 |
| Authors | C.J. Zahra, K. Chee, I.A. Yang, K.M. Fong |
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