
Thermo Fisher Scientific Bac-to-Bac N-His TOPO Cloning Kit
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Bac-to-Bac N-His TOPO Cloning Kit은 곤충세포에서 고수준 단백질 발현을 위한 효율적인 Baculovirus 시스템입니다. TOPO 기술로 5분 내 클로닝 가능하며, N-말단 His-tag 단백질 정제와 TEV 절단을 지원합니다. 빠르고 신뢰성 있는 발현 및 정제에 적합합니다.
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Bac-to-Bac™ N-His TOPO™ Cloning Kit
Bac-to-Bac™ Baculovirus Expression System은 곤충 세포에서 고수준 단백질을 발현하기 위한 효율적인 시스템입니다. 이 시스템은 곤충 세포 내 상동 재조합 대신 E. coli 내의 부위 특이적 전이(site-specific transposition)를 이용하여 재조합 바이러스를 생성합니다.
특징 및 장점
- 빠르고 신뢰성 있는 단백질 발현: 전통적인 baculovirus 시스템보다 빠르고 간편하며, 높은 수준의 단백질 발현 유지
- 효율적인 클로닝: pFastBac™ 벡터가 DH10Bac™ E. coli 내에서 부모 bacmid와 재조합되어 발현용 bacmid를 형성
- 시간 절약: 첫 번째 transfection에서 고순도 고역가의 재조합 baculovirus 입자 생산 가능 (약 10일 이내)
- 강력한 발현 프로모터: polyhedrin promoter 사용으로 Sf9, Sf21, High Five™ 등 다양한 곤충 세포주에서 높은 발현 수준 확보
- 새로운 pFastBacTOPO™ 벡터 제공: Blunt TOPO™ 클로닝 기술을 결합하여 쉽고 빠른 클로닝 가능
새로운 기능
- 고충실도 PCR 효소(예: Accuprime™ Pfx SuperMix)로 GOI 증폭
- 5분 내 TOPO™ 클로닝 완료
- Mach1™-T1R E. coli 사용으로 8시간 내 콜로니 확인 가능
- N-His TOPO™ 키트를 통해 N-말단 His-tag 단백질 발현 및 TEV 절단 지원
- Ni-chelating resin(예: ProBond™ Purification System)으로 정제
- AcTEV™ Protease로 native 단백질 생성
이 키트는 TOPO™ 클로닝 기술과 Bac-to-Bac™ 발현 시스템의 장점을 결합하여 손쉬운 클로닝과 고수준 단백질 발현을 가능하게 합니다.
사양
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| 항생제 내성 | Ampicillin (AmpR), Gentamicin (GmR) |
| 세포주 | High Five™, Sf21, Sf9 |
| 세포 유형 | Competent Cell |
| 클로닝 방법 | Blunt TOPO |
| 발현 메커니즘 | Insect Cell Expression |
| 발현 시스템 | Baculovirus |
| 용도(애플리케이션) | Protein Expression, Viral Vaccine Production |
| 반응 수 | 20 |
| 제품 라인 | Bac-to-Bac™, TOPO™ |
| 제품 유형 | Cloning Kit |
| 프로모터 | Polyhedrin |
| 단백질 태그 | His Tag (6x) |
| 선택 제제(진핵) | Ampicillin, Gentamicin |
| 벡터 | pFastBac/NT-TOPO |
| Unit Size | Each |
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