
Thermo Fisher Scientific Bac-to-Bac C-His TOPO Cloning Kit
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Bac-to-Bac C-His TOPO Cloning Kit은 곤충 세포에서 고수준 단백질 발현을 위한 효율적인 Baculovirus 시스템입니다. E. coli 내 특이적 전이를 이용해 빠른 재조합 바이러스 생산이 가능하며, C-말단 His 태그 단백질 정제 및 TEV 절단 부위 제공으로 정제와 단백질 회수에 용이합니다.
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Bac-to-Bac™ C-His TOPO™ Cloning Kit
Bac-to-Bac™ Baculovirus Expression System은 곤충 세포에서 고수준 단백질 발현을 위한 효율적이고 신뢰성 높은 시스템입니다. 이 시스템은 곤충 세포 내 상동 재조합 대신, E. coli 내의 부위 특이적 전이(site-specific transposition)를 이용하여 재조합 바이러스를 생성합니다.
주요 특징
- 빠르고 효율적인 발현: 기존의 baculovirus 시스템보다 빠르고 간편하며, 높은 단백질 발현 수준 유지
- 시간 절약: DH10Bac™ E. coli 내에서 재조합 후, 첫 번째 트랜스펙션에서 고역가 순수 바이러스 생산 가능
- 고발현 프로모터: 강력한 polyhedrin 프로모터를 사용하여 Sf9, Sf21, High Five™ 등의 다양한 곤충 세포에서 높은 발현 수준 달성
- C-His 태그 및 TEV 절단 부위 제공: 니켈 킬레이트 수지를 이용한 정제 및 AcTEV™ Protease를 통한 native 단백질 회수 가능
- TOPO™ 클로닝 기술 통합: 5분 내 blunt-end PCR 산물 클로닝 가능
새로운 기능
- pFastBacTOPO™ 벡터는 Blunt™ TOPO™ 벡터로, Mach1™-T1R E. coli와 함께 제공되어 신속한 클로닝 및 GOI 증폭 가능
- Mach1™-T1R E. coli는 빠른 doubling time으로 8시간 내 콜로니 확인 가능
- Invitrogen의 유일한 C-terminal TEV cleavage site 포함 벡터
사용 예시
- GOI를 고충실도 PCR 효소(예: AccuPrime™ Pfx SuperMix)로 증폭
- 5분 내 TOPO™ 클로닝 수행
- DH10Bac™ E. coli에서 재조합 bacmid 생성
- 곤충 세포 트랜스펙션 후 고순도 재조합 바이러스 생산
사양
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| 항생제 내성 | Ampicillin (AmpR), Gentamicin (GmR) |
| 세포주 | High Five™, Sf21, Sf9 |
| 세포 유형 | Insect Cell |
| 클로닝 방법 | Blunt TOPO |
| 발현 메커니즘 | Insect Cell Expression |
| 발현 시스템 | Baculovirus |
| 용도(애플리케이션) | Protein Expression, Viral Vaccine Production |
| 반응 수 | 20 Reactions |
| 제품 라인 | Bac-to-Bac™, TOPO™ |
| 제품 유형 | Cloning Kit |
| 프로모터 | Polyhedrin |
| 단백질 태그 | His Tag (6x) |
| 수량 | 20 Reactions |
| 선택 제제(진핵) | Ampicillin, Gentamicin |
| 벡터 | pFastBac/CT-TOPO |
| Unit Size | Each |
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